KP-N-NS:人肾上腺神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

B16BL6细胞类似产品：：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞

H4IIE细胞类似产品：：H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞

CV1细胞类似产品：：OVISE细胞、HSC细胞、H-2110细胞

WM-266-mel细胞类似产品：：H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：源自脑转移灶的肾上腺神经母细胞瘤。

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细胞形态：上皮细胞样

H23细胞类似产品：：EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞

SuDHL 5细胞类似产品：：Hs 578.Bst细胞、LS-411细胞、ChaGo K-1细胞

NS1-Ag4/1细胞类似产品：：MHH-CALL2细胞、MDA-MB-175细胞、BHK细胞

细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升GAO到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过GAO超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录Zui佳消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞类似产品：：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞

AAV293细胞类似产品：：COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞

HOP-62细胞类似产品：：LK2细胞、HUTU80细胞、T24细胞

P-2003细胞类似产品：：SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞

MFE-296细胞类似产品：：PIG1细胞、H-747细胞、A375mel细胞

P-388D1细胞类似产品：：OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞

NPA'87细胞类似产品：：Lewis-Lung细胞、HBZY1细胞、87 MG细胞

H-209细胞类似产品：：253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞

L-6细胞类似产品：：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞

HEC-251细胞类似产品：：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞

SJRH30细胞类似产品：：HMEL细胞、SKOV3细胞、WEHI 164 TC细胞

MyLa 2059细胞类似产品：：B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞

H-2330细胞类似产品：：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞

PK-136细胞类似产品：：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞

TE9细胞类似产品：：GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞

VM-CUB1细胞类似产品：：HSC4细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞、SW-948细胞

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H-1781细胞类似产品：：RD-2细胞、CHG-5细胞、HSC4细胞

MG-63细胞类似产品：：TEV-1细胞、NRK-52E细胞、FK81细胞

NIH3T3细胞类似产品：：MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞

DHBE细胞类似产品：：SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞

SKNBE2细胞类似产品：：PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞

UT-7细胞类似产品：：HCCC-9810细胞、Panc_04_03细胞、FL62891细胞

H22细胞类似产品：：KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞

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b.End3细胞类似产品：：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞

NALM-6细胞类似产品：：RCCJF细胞、NIH:OVCAR3细胞、MCF.7细胞

HFB细胞类似产品：：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞

A375SM细胞类似产品：：PBMC细胞、MKN-7细胞、SLMT1细胞

TE-15细胞类似产品：：MV4:11细胞、CHOS细胞、NCI-H820细胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞类似产品：：CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞

SNU-C1细胞类似产品：：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞

HUT 28细胞类似产品：：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞

WRL68细胞类似产品：：D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞

H711细胞类似产品：：IMCD-3细胞、SW 982细胞、MGHU3细胞

RLE-6TN细胞类似产品：：C3H10T1/2CL8细胞、U-251MG细胞、RWPE-1细胞

Tn 5B1-4细胞类似产品：：H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞

SKO3细胞类似产品：：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞

BC-022细胞类似产品：：EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞

FRTL-5细胞类似产品：：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞

DHL-5细胞类似产品：：KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞

T-CAM2细胞类似产品：：SUM-52PE细胞、Clone Y1细胞、H1993细胞

HMVEC细胞类似产品：：NCI H226细胞、MCF12A细胞、H4细胞

NCIH1876细胞类似产品：：OP-9细胞、HO1-N1细胞、NCI H2106细胞

SCI1细胞类似产品：：HC11 Mammary Epithelium细胞、SK-NSH细胞、PIGI细胞

A375-SM细胞类似产品：：RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞

EMT-6细胞类似产品：：CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞

WSUDLCL2细胞类似产品：：CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞

GM03569D细胞类似产品：：MSTO-211H细胞、MDA MB 175 VII细胞、HL-60 clone15细胞

BEL 7405细胞类似产品：：NCI-H128细胞、D-341细胞、IOSE80UBC细胞

WI38细胞类似产品：：NCIH748细胞、WC00059细胞、CCRF/CEM-C7细胞

LN 229细胞类似产品：：RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞

H740细胞类似产品：：Neuro2a细胞、SUM-190细胞、IOSE80细胞

HFT 8810细胞类似产品：：CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞

S3 HeLa细胞类似产品：：MDA-MB 231细胞、MPVECs细胞、Melan-a细胞

CLONE M3细胞类似产品：：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞

Karpas299细胞类似产品：：DAN-G细胞、PL-11细胞、MDAPCa2b细胞

NU-GC-4细胞类似产品：：TK-1细胞、Ramos G6.C10细胞、BERH-2细胞

MDCK II细胞类似产品：：SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞

FDCP-1细胞类似产品：：M21细胞、HCC1599细胞、GT1-1细胞

PC3M-2B4细胞类似产品：：COLO684细胞、Line 522细胞、22Rv-1细胞

LAN-5细胞类似产品：：GA-10细胞、MCM细胞、ETCC007细胞

HOP 92细胞类似产品：：WiDr/S细胞、HOP 62细胞、Hs 888.Lu细胞

LM8细胞类似产品：：ECV 304细胞、PK-13细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞

CCRF-CEM/S细胞类似产品：：Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞

SKMES1细胞类似产品：：MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞

UPCI-SCC-90细胞类似产品：：OCI AML4细胞、SU-DHL-10细胞、HCCC-9810细胞

SK Mel 1细胞类似产品：：OVCAR 5细胞、MUG-Chor1细胞、SW-579细胞

Bac1 2F5细胞类似产品：：X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞

MES13细胞类似产品：：FTC-133细胞、COLO201细胞、A-2780细胞

EL 4细胞类似产品：：L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞

REC 1细胞类似产品：：HCC-4006细胞、U266B1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞

HT55细胞类似产品：：SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞

GM03570细胞类似产品：：Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞

STTG1细胞类似产品：：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞

SF-295细胞类似产品：：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞

JIMT1细胞类似产品：：SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞

L-02细胞类似产品：：H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞

H-23细胞类似产品：：L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞

NCI-HUT-596细胞类似产品：：675T细胞、A 253细胞、CWR22Rv1细胞

SR细胞类似产品：：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞

KRC Y细胞类似产品：：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞

NW38细胞类似产品：：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞

NW38细胞类似产品：：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞

SK HEP-1细胞类似产品：：HEK-293-H细胞、HTR8细胞、HTori 3细胞

C 643细胞类似产品：：NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞

ML2细胞类似产品：：HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞

PA-1细胞类似产品：：Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞

Pa18C细胞类似产品：：HS-766T细胞、BSC40细胞、NCI-441细胞

Mono Mac6细胞类似产品：：138 MG细胞、KATOIII细胞、SCC-9细胞

EFM-192B细胞类似产品：：NCIH548细胞、CEK细胞、Hs 578T细胞

SUDHL-8细胞类似产品：：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞

SUM-52-PE细胞类似产品：：MDA MB 175 VII细胞、HN13细胞、HuH1细胞

MDCC-MSB1细胞类似产品：：GA10细胞、CHO Lec1细胞、KE-37细胞

Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞类似产品：：OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞

CA 46细胞类似产品：：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞

Jurkat 77细胞类似产品：：QBI-293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Kupffer细胞

P3J-HR-1细胞类似产品：：HFF1细胞、HIEC6细胞、MCF7-GFP细胞

MO59J细胞类似产品：：PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞

Sf-21细胞类似产品：：KAT5细胞、MiaPaca.2细胞、PC10细胞

CHOS细胞类似产品：：MCF 7细胞、HBE 135-E6E7细胞、TYKnu细胞

Ramos.2G6.4C10细胞类似产品：：Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞

EB1细胞类似产品：：Colo320细胞、CCFSTTG1细胞、J774A1细胞

138 MG细胞类似产品：：HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞

P3JHR-1细胞类似产品：：SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞

NCIH1694细胞类似产品：：GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞

NCIH1618细胞类似产品：：CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞

KP-N-NS:人肾上腺神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

CCD 19Lu细胞类似产品：：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞

A72细胞类似产品：：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞

GM04154B细胞类似产品：：CG-4细胞、HCV-29细胞、SNU-354细胞

NCIH69细胞类似产品：：RD 2细胞、H-1963细胞、ASPC1细胞

HPF细胞类似产品：：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞

McA-RH 8994细胞类似产品：：A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞

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