KNS-62:人肺支气管鳞状细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

TE-15细胞类似产品：：MV4:11细胞、CHOS细胞、NCI-H820细胞

16-HBE细胞类似产品：：MN60细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、IPLB-Sf21-AE细胞

624细胞类似产品：：MCMEC细胞、D10.G4.1细胞、CMT 64细胞

LICR-LON-HN6细胞类似产品：：NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

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细胞形态：上皮细胞样

DR2R 1610细胞类似产品：：GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞

SNU-C2B细胞类似产品：：MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞

HNE2细胞类似产品：：SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞

细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。

细胞传代方法：每周换液２次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

UCLA-SO-M14细胞类似产品：：C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞

NSH细胞类似产品：：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞

H-1755细胞类似产品：：NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞

Ramos 2G6 4C10细胞类似产品：：PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞

U373-MG细胞类似产品：：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞

B-3细胞类似产品：：COLO-738细胞、Hs578Bst细胞、H-2452细胞

LS174细胞类似产品：：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞

MDST8细胞类似产品：：NCIH2286细胞、A-704细胞、MBdSMC细胞

SKHEP1细胞类似产品：：Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞

WBF344细胞类似产品：：HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞

H1092细胞类似产品：：MM134细胞、C166细胞、MCF/Adr细胞

7404细胞类似产品：：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞

NCI-H1993细胞类似产品：：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞

MHCC 97-H细胞类似产品：：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞

TN5B14细胞类似产品：：MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞

CAL-27细胞类似产品：：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞

H-292细胞类似产品：：WEHI164细胞、PC3M细胞、NCI-H-128细胞

KCL22S细胞类似产品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞

RAMOS2G64C10细胞类似产品：：McCoy细胞、MADB106细胞、U-87MG细胞

IEC-18细胞类似产品：：McA-RH7777细胞、CTV1细胞、Kit 225细胞

HUT-226细胞类似产品：：RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞

GM03570细胞类似产品：：Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞

H2052_MM细胞类似产品：：SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞

MC3T3-E1 Subclone 24细胞类似产品：：H1666_DA细胞、526mel细胞、Lung cancer-1/squamous细胞

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RGE细胞类似产品：：Hs 683.T细胞、L615细胞、NOZC-1细胞

MDAMB231细胞类似产品：：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞

NU-GC-3细胞类似产品：：MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞

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P116细胞类似产品：：MH-22a细胞、DMS 114细胞、CHP 126细胞

C-32细胞类似产品：：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞

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Roswell Park Memorial Institute 1788细胞类似产品：：EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞

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CLONE M3细胞类似产品：：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞

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NCI-H820细胞类似产品：：P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞

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MDCKII-WT细胞类似产品：：MMAc-SF细胞、HRGEC细胞、JVM2细胞

H69C细胞类似产品：：H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞

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Hs-578-T细胞类似产品：：H2196细胞、OKa-C-1细胞、H-2228细胞

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Tadarida brasiliensis 1 lung细胞类似产品：：JCA-1细胞、SCC15细胞、P30/OHK细胞

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MDA-134细胞类似产品：：CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞

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BEL-7405细胞类似产品：：H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞

SUM52PE细胞类似产品：：AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞

TM3细胞类似产品：：HRCEC细胞、NS653细胞、HSC-1细胞

CNE-1细胞类似产品：：HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞

WEHI 3B细胞类似产品：：Tca-8113细胞、4T1.2细胞、Nb2-11细胞

DB细胞类似产品：：RGB细胞、NBL-3细胞、HEL299细胞

JEG3细胞类似产品：：L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞

KNS-62细胞类似产品：：UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞

M3 Clone M-3细胞类似产品：：HMy2.CIR细胞、HN-6细胞、T/G HA-VSMC细胞

RT-BM-1细胞类似产品：：HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞

GM03190细胞类似产品：：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞

KNS-62:人肺支气管鳞状细胞癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

SBC-3细胞类似产品：：HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞

Clone Y-1细胞类似产品：：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞

PC-9S1细胞类似产品：：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞

CAL 51细胞类似产品：：Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞

AR-42J细胞类似产品：：SCC4细胞、RAEC细胞、RCC_7860细胞

SUSM-1细胞类似产品：：NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞

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