超敏型化学发光液(Super ECL)
一、产品简介。
本产品是超敏型 ECL,可以检测到飞克级浓度的蛋白,常用于 western blot 实验中表达水平较低的蛋白检测。
二、运输与存储条件。
本产品低温运输,4 ℃避光保存,有效期 12 个月。
三、特点与优势。
1. 本产品主要用于表达水平较低的蛋白检测,可以检测到飞克级浓度的蛋白。
2. 本产品特异性强,背景干净清晰。
四、使用说明(western blot 显影)。
1. Western blot 实验中孵育完一抗和二抗的 PVDF 膜用 TBST 洗涤 3 次,备用。
2. Super ECL 工作液配制:根据 PVDF 膜的大小,估算需要的 Super ECL 工作液体积,将试剂盒中的 A 液与 B 液等体积混合,制备 Super ECL 工作液。
3. Super ECL 工作液孵育。将 PVDF 膜自 TBST 溶液中取出,用吸水纸吸去多余液体,置于化学发光仪显影用的底板上,滴加 Super ECL 工作液,使其覆盖均匀,室温孵育 1-2 min。
4. 显影。将载有 PVDF 膜的底板放入化学发光仪,开启化学发光检测程序,检测不同时间点的荧光强度。
5. 若利用 X 感光片显影,则将孵育完 Super ECL 的 PVDF 膜置于新的保鲜膜上,包裹妥当,置于暗盒内,压上 X 感光片,曝光一段时间后取出 X 光片,依次放入显影液和定影液,显影。
五、注意事项。
1. 本产品一般不用于检测表达水平较高的蛋白,以免荧光强度过高导致背景较深。
2. 吸取 A 液和 B 液的过程中必须更换枪头,否则导致二者相互污染,检测效果减弱,最终失效。
3. 请盖紧 A 液与 B 液的瓶盖,特别是 B 液,含有氧化剂,易被还原而失效。
4. Super ECL 孵育 2 min 后即可检测,并尽量在 30 min 内检测完毕,以免荧光衰减导致实验失败。
5. NaN3(叠氮化钠)能抑制辣根过氧化物酶的活性,二抗孵育过程中应避免使用 NaN3。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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