一.土壤全氮含量测定试剂配制
1、标准溶液
盐酸标准溶液[c (HCl)=0.1000 mol/L],移取9 mL 浓盐酸(盐酸浓度36%~38%)用蒸馏水稀释并定容至1000 mL容量瓶,摇匀,用无水碳酸钠进行标定。
无水碳酸钠标定方法:取50mL蒸馏水,加入10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,用配置好的盐酸溶液滴定至溶液由变为暗红色,消耗盐酸体积记为V0;再准确称取经300℃烘干1小时的无水碳酸钠0.2g,精确至0.0001,记为m,溶于少量蒸馏水中定容至50mL,加入10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,用配置好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸3分钟,冷却后继续滴定至溶液呈暗红色,消耗盐酸体积记为V。
C(HCl)=m/[(V-V0)*0.05299],其中C(HCl)单位为mol/L。
2、40%氢氧化钠溶液1000 ml(400 g/L)
400g氢氧化钠溶解于1000mL无氨蒸馏水中;
3、2%浓度硼酸溶液2000 ml (20g/L)
分析纯硼酸40g溶于2000ml无氨蒸馏水中;
4、甲基红-溴甲酚绿混合指示剂
A:称取0.1g 甲基红,用无水乙醇定容至100 ml;
B:称取0.1g 溴甲酚绿,用无水乙醇定容至100 ml.
临用时按照A:B=1:5混匀。取10ml加入1000ml硼酸溶液中。
5、高锰酸钾溶液:2.5g高锰酸钾溶于50mL蒸馏水中。
6、1:1硫酸溶液:100mL浓硫酸缓慢加入100ml蒸馏水中,边加边搅拌。
二.土壤全氮含量测定样品消解
1.称取风干土样过40目筛的土样约0.5g(记录质量w),加入消化管中,同时取空消化管两支,分别往每管中加入1mL高锰酸钾溶液,轻轻晃动消化管,慢慢加入2mL1:1硫酸溶液,轻轻晃动消化管,室温静置5min;
2.加0.5g还原铁粉于消化管底部,尽量保证不沾壁,轻轻晃动消化管后室温静置10min;3. 将20支消化管全部置于石墨消解仪上,盖好盖子,打开废气回收系统以及石墨消解仪,温度设置为:直线加热100℃,40min;
4.取出消化管冷却后开盖,每管中加入加速剂2g,用移液管加入10mL浓硫酸,摇匀,重新放置在消解仪上,盖好盖子,温度设置为:曲线加热100℃,10min;200℃,10min;350℃,30min;400℃,1h;观察样本呈现黄绿色即为消解完全,否则,继续加热消解至样本呈黄绿色。
5.取出消化管冷却至室温,切勿在样品冷却之前开盖。
6.关闭石墨消解仪,待样品冷却后关掉废气回收系统。
三.全氮测定
1.将滴定酸桶,硼酸桶,碱桶,蒸馏水桶管路按照标示插好(滴定酸桶的管子应插到底部),将硼酸桶,碱桶,蒸馏水桶的液位检测插好。
2.打开定氮仪与循环水系统,进入清洗界面,先进行两次硼酸清洗管路,再进行一次换酸清洗,一次碱管路清洗。
3.装一只空的消化管,关好防护门。点击【测试】菜单系统自动进入操作模式界面,选择【自动测试】,常规,设置参数为:样品编号;样品重量:0.000g。滴定酸浓度:标定好的盐酸浓度(mol/L);空白值:0.000mL;蛋白系数:样品固定的转换系数。硼酸:15ml;稀释水:20mL;碱液:0mL;蒸馏:5min;设置完成后,点击【确定】即可进入自动测试功能。
4.测试完成后打印测定结果。
5.打开安全门,戴棉质手套取出消化管,放入样品空白管,关好防护门。点击【测试】菜单系统自动进入操作模式界面,选择【自动测试】,常规,碱液参数设置为40mL,其余参数同步骤3,重复步骤3。
6.样品测定:设置参数为:样品编号;样品重量:称取的样品实际质量,g。滴定酸浓度:标定好的盐酸浓度(mol/L);空白值:两支空白管滴定用酸量的平均值,mL;蛋白系数:样品固定的转换系数。硼酸:15ml;稀释水:20mL;碱液:40mL;蒸馏:5min;设置完成后,点击【确定】即可进入自动测试功能。
7.测试完成后打印测定结果。
8. 进行仪器清洗,然后关闭循环水系统及定氮仪,然后清洁仪器。
四.注意事项
1. 禁止使用边缘有缺口,或者有裂缝的消化管进行消解,消解时盖子放置好,以免废气泄露,消解仪工作状态尽量不要靠近仪器,但是要经常观察管内变化,若出现异常情况,立即断电。
2. 开始蒸馏时,消化管中液体的总体积以不超过总体积的1/3。
3. 拿取消化管时,注意高温烫伤。放置消化管时,左右旋转几下,确保消化管与蒸馏头密封。
4. 每日做完实验要用洗瓶冲洗蒸馏头残余碱液,仪器前部的槽皿中,如果积有液体,请擦洗干净。
5. 为了延长防溅装置的使用寿命,请每天工作结束后清洗两次左右:即消化管加水150mL空蒸5分钟。(空蒸仪器把加碱量设置为“0”)。
6. 关机前,需将接收杯内液体排净,仪器使用结束后要关闭水源、电源,仪器上要放置一空消化管(防止防溅装置内残留液体流到仪器上)。
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