总多糖含量测定试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。
总多糖含量测定试剂盒测定原理:
利用水提醇沉法提取总多糖,苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制:
试剂一:12mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:无水乙醇,自备;
试剂三:浓硫酸,自备。
总多糖提取:
样本烘干粉碎,称取约0.05g样本,加入1mL水,充分匀浆。100℃水浴提取2h(必须盖紧盖子防止水分流失),冷却后10000g离心10min,取上清。吸取0.2mL上清,慢慢加入0.8mL无水乙醇,混匀后4℃静置过夜,10000g离心10min,弃上清,沉淀中加入1mL水,充分混匀溶解沉淀。
测定步骤:
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至490nm,蒸馏水调零。
2、 吸取400µL上清,加入200µL试剂一和1mL浓硫酸,混匀后90℃水浴20min,流水冷却。取1mL加入比色皿,于490nm下测定吸光值A。
总多糖含量测定试剂盒总多糖含量计算:
以葡萄糖作为对照品,标准条件下测定回归方程为y = 15.962x - 0.0037,R2 = 0.9973,x为葡萄糖含量(mg/mL),y为吸光值。
总多糖含量(μg/g干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000
=313.24×(A+0.0037) ÷W
V1:醇沉后重新溶解后的体积,1mL;V2:进行醇沉的体积,0.2mL;V3,提取时加入水的体积,1mL;W:样本质量,g;1000,mg到μg的换算系数。
关键字: 总多糖含量测定试剂盒;总多糖含量测定试剂盒;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,提供科研类试剂、耗材、仪器、技术服务的生物企业。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学等 。旗下拥有 “雅吉生物”、“晶风生物”、“彩佑实业”、“GTX” 品牌。通过公司各部门员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以优良的技术、优质的产品、良好的信誉为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。
公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持,物流售后服务等多部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户,雅吉生物的试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员好评,先后在权威杂志文章中被引用。
本公司郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到。