水样中汞离子(Hg2+)浓度检测试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
Hg2+是水体中重要有毒重金属离子,易被生物体吸收并且积累,能够通过食物链进一步传递,从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。
水样中汞离子(Hg2+)浓度检测试剂盒测定原理:
水样经消化后,在酸性环境中,Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物,溶于三氯甲烷,在490nm测定吸光度,即可计算Hg2+含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、可调式移液枪、浓硫酸、三氯甲烷和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体50mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体8mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加蒸馏水2mL充分溶解。
试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:粉剂×1瓶,4℃避光保存。加三氯甲烷(自备)50 mL充分溶解。
标准品:液体1mL×1瓶,4 nmol/mL Hg2+,室温保存。
水样中汞离子检测:
1. 消化
(1)水样消化:取带盖管,依次加入1mL水样,100 μL浓硫酸(自备),800μL试剂一,混匀后盖紧,置于40℃水浴中消化24 h。
(2) 标准品消化:取带盖管,依次加入100μL标准品,900μL蒸馏水,100 μL浓硫酸,800μL试剂一,混匀后盖紧,置于40℃水浴中消化24 h。
2. 取出各管,室温放置约20min,使之冷却。然后加入160μL试剂二,盖紧后充分震荡,直到无色。开盖静置30min,期间摇荡数次,使其中气体溢出。
3. 加入800μL蒸馏水,40μL试剂三;盖紧后混匀后,静置5min;加入200 μL试剂四,充分震荡后静置分层。
4. 取100μL移液枪,排气后,沿管壁小心插入下层,吸取100μL下层液体,加入到EP管中,再加入1 mL试剂五,盖紧后充分震荡,直到无色。
5. 静置分层后,取1000μL移液枪,调节刻度到700μL,排气后沿管壁小心插入下层,吸取700μL下层液体,加入1mL玻璃比色皿,于490nm处比色,记录各管吸光值。
注意:标准管只需测定一次。
水样中汞离子(Hg2+)浓度检测试剂盒计算公式:
Hg2+(nmol/L)= C标准品÷标准品稀释倍数×A测定管÷A标准管×V总
= 400×A测定管÷A标准管
C标准品:标准品浓度,4 nmol/mL;标准品稀释倍数:(100μL标准品+900μL蒸馏水)÷100μL标准品=10;V标:0.1 mL;V总:1L=1000 mL。
注意事项:
1. 水样中1000μg/L铜离子,20μg/L银离子,10μg/L金离子,5μg/L铂离子对测定无干扰。
2. 测定过程中应注意安全,佩戴口罩和手套,以免吸入或沾到有毒及危险试剂。
3. 最低检出限为0.1μmol/L。
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