一、 试剂盒简介
本试剂盒可从动物细胞或组织中快速提取总RNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚/ 氯仿抽提,全程仅需15 min。试剂盒中DNA Removing Spin Columns能够有效去除裂解产物中的基因组DNA,另外,试剂盒中配有gDNA Remover膜上消化模块,可有效去除基因组DNA 污染;RNA Spin Columns能高效的结合RNA,配以优化后的Buffer溶液,使得到的总RNA纯度高,无蛋白和其他杂质污染,可用于RT-PCR、Real-time PCR、芯片分析等多种下游实验。
二、产品组分
Components | B0004D (100 Preps) |
Lysis Buffer | 60 ml |
Wash Buffer*1 | 12 ml |
Elution Buffer | 5 ml |
gDNA Remover | 220 µl |
DNA Removing Spin Columns (with Collection Tubes) | 50 Preps |
Spin Columns(with collection Tubes) | 50 Preps |
*1:Wash Buffer使用前须加入24毫升的无水乙醇,混匀后方可使用。
三、试剂保存条件
本试剂盒中的Lysis Buffer、Wash Buffer、Elution Buffer、DNA Removing Spin Columns
和Spin Columns建议保存在室温条件,gDNA Remover建议保存在-20℃冰箱中。
四、试剂盒特点
1、纯度高:细胞裂解产物先经过DNA吸附柱吸附去除基因组DNA,然后过RNA吸附柱,又使用gDNA Remover处理,这2步高效去除了混有在RNA的基因组DNA;
2、简单快速:步骤简单,10分钟即可得到高纯度的RNA;
3、适用性广:使用本试剂盒提取的RNA可用于RT-qPCR、Northern Blotting、cDNA文库构建、RNA测序等各种实验;
4、所需样品少(得率高):可以提取低至2万细胞或1 mg组织的RNA;
5、健康安全:不使用挥发性的酚、氯仿等有毒/致癌物质,无须DEPC灭菌,更有益于身体健康。
五、注意事项
1、Wash Buffer使用前须加入24毫升的无水乙醇,混匀后方可使用。
2、建议使用前把Elution Buffer分装成3份,以减少污染的概率。
3、RNA提取需在室温进行,提取过程中不可置于冰上。
4、建议用6孔板或者35 mm培养皿培养细胞,培养至合适的细胞密度进行RNA提取(建议培养至80%以上的细胞密度),不建议用100 mm培养皿培养的细胞直接裂解提取RNA,否则可能导致细胞裂解不充分或离心柱堵塞或导致基因组残留。
5、在RNA提取过程的最后一步将RNA从硅基质膜上洗脱下来时,一定要将洗脱液加到膜上,而不是侧壁上,否则达不到溶解RNA的目的。
关键字: RNA提取,超纯,试剂盒,细胞;