ActSep®CD3/CD28分选激活磁珠(ActSep®CD3/CD28Separation & Activation Magnetic Beads)
产品货号:GMP-TL603
♦产品描述(Description)
ActSep® CD3/CD28单抗偶联分选激活磁珠可用于分选人 CD3+T 细胞,并提供了一种不需要抗原 呈递细胞或抗原就能激活和扩增 T 细胞的简单方法。通过在磁珠上偶联抗 CD3 和抗 CD28 单克隆抗体,提供 T 细胞激活和扩增需要的初级和协同刺激信号,实现 T 细胞的分选、激活和扩增。此 款磁珠适用于人 T 细胞,CAR-T 等多种 T 细胞培养技术的应用。
♦ 产品特点(Advantages)
1、 分选、激活于一体,省时高效
2、4.5μm超顺磁珠,与细胞大小匹配
3、方便分离,易操作
4、高稳定性、高安全性
5、产品符合ISO9001和ISO13485质控要求
♦ 反应种属(Reaction Species)
人
♦ 浓度(Concentration)
2×108beads/mL
♦内毒素(Endotoxin)
<0.5EU/mL
♦ 含量(Content)
1mL
♦ 性状(Character)
棕色悬浊液体
♦ 储存条件(Storage conditions)
2~8℃
♦ 有效期(Validity period)
24个月
♦ 使用方法(Usage method)
1. PBMC 细胞处理:
1.1 将人的PBMC细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中,取样计数并标记CD3进行流式检测。
1.2 根据PBMC细胞CD3阳性率用含1% HSA的PBS缓冲液调节CD3 +T细胞密度至1×107个/mL。
2. ActSep® CD3/CD28分选激活磁珠的清洗:
2.1 重悬磁珠(涡旋不低于30s,或者颠倒混匀5 min)。
2.2 按照磁珠数和CD3+T细胞孵育比例(推荐比例范围为1:1 ~ 3:1。在此推荐范围内,随着磁珠量的增加,CD3+T细胞分选效率会随之提升。在实际应用中,客户可根据实际情况摸索调整),取出所需磁珠量,转移到离心管中。
2.3 向上述离心管中加入l mL 含1% HSA的PBS缓冲液,将磁珠进行重悬,吹打或涡旋进行润洗。
2.4 将上述装有重悬磁珠的离心管放在磁力架(磁珠专用)上,静置 1 min,弃去上清,注意不要吸取到磁珠。
3. 磁珠分选和激活CD3+T 细胞:
3.1 向上述洗涤后的磁珠中按比例加入调整好 CD3+T 细胞密度的 PBMC,混合均匀。
3.2 将上述离心管置于转速 15~20 rpm 的混样仪上,室温孵育 30 min。
3.3 将上述离心管放在磁力架(磁珠专用)上,静置 1min,收集上清并进行计数和流式检测, 标记CD3。
3.4 用含200 IU/mL rh IL-2(同立海源, Cat: GMP-TL777)的完全培养基(客户可根据自身实际 实验条件进行调整,根据实验需求明确是否使用自体血浆)重悬磁珠和细胞的混合物,并调整细 胞密度为0.5~1×106个/mL。
3.5 将上述细胞悬液置于细胞培养容器中,于 37℃,5% CO2培养箱中培养 48h,取样去除磁珠 后计数并测试激活效率(CD69+CD25+百分比)。
4. 细胞的扩增和培养:
观察细胞状态并定期补液,调整细胞密度至 0.5~1×106个/mL(根据需要进行流式检测)。将细胞 培养至适宜时长(一般 12~14 天)后即可收获细胞。
♦ 实验数据(Experimental Data)
关键字: CD3/CD28;分选激活磁珠;分选磁珠;激活磁珠;
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