ActSep® CD3/CD28激活磁珠(ActSep®CD3/CD28 Activation Magnetic Beads),GMP级
产品货号:GMP-TL601
♦ 产品描述(Description)
ActSep®CD3/CD28激活磁珠提供了一种不需要抗原呈递细胞就能激活和扩增T细胞的简单方法。通过在磁珠上偶联抗CD3和抗CD28单克隆抗体,提供T细胞激活和扩增需要的初级和协同刺激信号,实现T细胞的激活和扩增。
![原理图](https://www.seafrom.com/ckeditor/20190718/8ac51bbc11bb64d2c7e1660e9c13a5b5.jpg)
♦ 产品特点(Advantages)
1、4.5um磁珠与细胞大小匹配
2、T细胞活化无需滋养层细胞
3、产品表现稳定,对细胞损伤小
4、9-14天可扩增100倍以上
5、ISO13485医疗器械质量管理体系认证
♦ 浓度(Concentration)
2×108beads/ml
♦ 反应种属(Reaction Species)
人
♦内毒素(Endotoxin)
<2EU/mL
♦ 适用范围
T 淋巴细胞
♦ 保存温度(Storage Temperature)
2~8℃
♦ 使用方法(Usage method)
一、ActSep®CD3/CD28激活磁珠的清洗:
1.1 重悬磁珠(涡旋超过30s,或者颠倒混匀5min);
1.2 按实际用量需求,将确定体积的磁珠转移至离心管中;
1.3 加入等体积的含1% HSA的PBS缓冲液,若磁珠体积小于1 mL,则加 l mL含1% HSA的PBS缓冲液,进行重悬润洗,吹打或涡旋;
1.4将上述装有重悬磁珠的离心管放在磁力架(磁珠专用)上,静置1min,弃去上清,注意不要吸取到磁珠。
1.5于上述离心管中加入与1.2等体积的含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基重悬磁珠备用。
二、磁珠激活和扩增 T细胞
2.1 用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基调整T细胞密度至1~1.5×106cells/mL,将调整好密度的细胞置于细胞培养容器中。
2.2按照磁珠和T细胞数量比例(推荐比例范围为1:1 ~ 3:1。在实际应用中,客户可根据实际情况摸索调整),将上述1.5重悬的磁珠按比例加入铺好细胞的培养容器中。
2.3将上述培养容器置于37℃,5% CO2培养箱中培养。
2.4根据实验需求,可在培养阶段对活化的T细胞进行进一步分析(取样后,去除磁珠并对细胞进行流式检测)。
2.5逐日观察细胞状态,建议每周至少两次对细胞进行取样计数,并定期补液。
2.6当细胞密度超过2.5×106cells/mL或培养基变黄时,调整细胞密度至0.5~1×106cells/mL。将细胞培养至适宜时长后(一般12~14天)即可收获细胞。
2.7若培养时间需延长,可考虑通过对细胞再刺激培养,具体如下:
2.7.1重新刺激前,将细胞转至干净的无菌离心管中,用磁力架(磁珠专用)去除使用过的磁珠。
2.7.2将含有细胞的悬液转至新的离心管中,用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基调整T细胞密度至0.5~1×106cells/mL。
2.7.3重复磁珠清洗、磁珠激活和扩增T细胞的步骤。细胞培养至适宜天数后,可去除磁珠收获细胞。
注意事项:
1.细胞扩增后需定期轻轻吹打培养容器中的细胞悬液,以便充分分散磁珠和细胞。
2.培养过程中,可以每2~3天进行细胞计数,细胞计数前均需去磁,去磁过程:将细胞培养器中的细胞混悬均匀后取样至离心管中,将其放在磁力架(磁珠专用)上,静置1min,取上清至新的离心管。
3.培养过程中可通过流式细胞术对T细胞的表型、活化状态进行检测。
![磁珠使用说明](https://www.seafrom.com/ckeditor/20190718/0c0f065e2355875f48a7aab8361302dc.jpg)
♦ 实验数据(Experimental Data)
![磁珠实验数据](https://www.seafrom.com/ckeditor/20190718/cb6534f10092ec818a19011ce2d41dc3.jpg)
![磁珠实验数据](https://www.seafrom.com/ckeditor/20190718/17014197f0fe9208253ef5c137938288.jpg)
♦ 参考文献
Donor-Derived CD7 Chimeric Antigen Receptor T Cells for T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia: First-in-Human, Phase I Trial
影响因子:44.54
♦ 注意事项
1.细胞扩增后需定期轻轻吹打培养容器中的细胞悬液,以便充分分散磁珠和细胞。
2.培养过程中,可以每2~3天进行细胞计数,细胞计数前均需去磁,去磁过程:将细胞培养器中的细胞混悬均匀后取样至离心管中,将其放在磁力架(磁珠专用)上,静置1min,取上清至新的离心管。
3.培养过程中可通过流式细胞术对T细胞的表型、活化状态进行检测。
注意:For research and manufacturing use.