中文名:5-异硫氰酸荧光素 (异构体I)
英文名:5-FITC(isomer I)
中文别名:荧光素-5-异氰酸酯 (异构体I)|异硫氰酸荧光素 (异构体I)|5-异硫氰酸荧光素 (异构体I)|5-FITC (异构体I)
英文别名:3326-32-7|FITC|Fluorescein isothiocyanate isomer I|5-FITC|FLUORESCEIN-5-ISOTHIOCYANATE|5-isothiocyanatofluorescein|fluorescein 5-isothiocyanate|3',6'-dihydroxy-5-isothiocyanato-3H-spiro[isobenzofuran-1,9'-xanthen]-3-one|FITC isomer 1|MFCD00005063|3012-71-
纯度:≥95% (HPLC)
货号:F272903
包装:100mg、250mg
Cas号:3326-32-7
存储温度:避光,-20°C储存,充氩,干燥
产品介绍:
产品简介
外观:黄色粉末
纯度:≥95% (HPLC)
产品参数
Ex(nm):494
Em(nm):520
Solvent:DMSO
产品描述
FITC能和各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中具有强烈的黄绿色荧光。通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。用于医学,农学和畜牧等方面,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。
FITC标记抗体流程
(1)将待交联的蛋白(浓度≥1mg/mL)对交联反应液透析三次4℃,至pH=9.0。交联反应液配制方法:7.56g NaHCO3,1.06g Na2CO3,7.36g NaCl,加水定容至1 L。
(2)将FITC溶于DMSO中,浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。
(3)按P:F(蛋白质:FITC)=1mg:150μg 的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中,边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀,暗处4℃反应8h。
(4)加入5mol/L的NH4Cl至终浓度50mmol/L,4℃终止反应2h。
(5)将交联物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。
(6)交联物的鉴定
蛋白浓度(mg/mL) = [ A280– 0.31×A495 ] / 1.4
F/P比例: 3.1×A495 / [A280 – 0.31×A495 ],该值应介于2.5~6.5之间。
(7)FITC交联的蛋白应置于pH 7.4的磷酸盐缓冲液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,4℃避光保存。
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