腔肠素-H;钙离子荧光探针腔肠素 h

腔肠素-H  Coelenterazine H

分子式：C26H21N3O2   分子量：407.46                                    

简介：腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。我司腔肠素-H经过核磁结构验证，并在体外进行生物发光强度检测，其发光强度高，和进口对照品牌效果相媲美。

物理性状及指标：

激发波长（nm）：……………………437

发射波长（nm）：……………………466

储存条件：-20℃，避光防潮密闭干燥, 保存在惰性气体下以避免接触空气。

运输条件：湿冰运输

应用方向：

1、腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物；

2、腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

3、更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程，使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。

使用方法（仅供参考）：

腔肠素溶解特性：腔肠素及所有衍生物溶于乙醇或者甲醇，切忌溶于DMSO。腔肠素的水溶性相当低，一般情况需用乙醇等配置成母液后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作液，现配现用。

腔肠素母液的配制：4mg加入2ml无水乙醇配制成5mM（相当于2mg/ml）母液，避光备用。对于所有进行荧光信号检测的试验建议溶液现用现配。不建议将腔肠素的乙醇母液放到-20℃或者更低温度保存，因为其高能量的二氧环丁酮结构即使在低温的情况下也会瞬时降解，导致荧光强度明显变弱。

腔肠素工作液的配制：可直接用PBS或者其他类型生理缓冲液稀释。现配现用。可直接用不含Ca2+/Mg2+的PBS缓冲液将储存液稀释到实验所需的工作液浓度，4°C避光短暂存放。若是体外实验，需要使用前室温平衡15-20min。

【注意】

●我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。

●腔肠素H的干燥粉末在密封状态下较稳定，可避光保存于-20℃或更低温度。可通过在管内充入惰性气体（氮气或氩气）防止其氧化。

●当使用多孔板进行荧光值的检测时，建议通过设置对照孔来消除由于腔肠素在工作液中不断被氧化所带来的误差。

●不同种类的荧光素酶存在很大的区别。如腔肠素H可作为海肾荧光素酶的底物，但对于Gaussia荧光素酶是无效的。

●部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。