中文名：Recombinant Taq DNA Polymerase Protein
英文名：Recombinant Taq DNA Polymerase Protein
中文别名：DNA polymerase I; thermostable; DNA-directed DNA polymerase; Taq DNA 聚合酶; 不含DNA的Taq DNA 聚合酶; TAQ DNA 聚合酶
纯度：>95%
货号：A156186
包装：1000u
Cas号：9012-90-2
存储温度：-20°C储存,避免反复冻融
产品介绍：
产品描述：
Taq DNA Polymerase简称Taq酶，是最常用的DNA聚合酶之一。
Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶，分子量是94 kDa ，是将Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因重组表达后，分离提取而得到的。
产品内容：
1. Taq DNA Polymerase ( 5 U/μL )
2. 10×Taq Buffer（Mg2+Plus）：200mM Tris-HCl,500mM KCl,20mM MgCl2,1mM DTT,pH9.3
活性定义：
一个单位的 Taq DNA 聚合酶是在74° C 下30分钟内将10nmol 脱氧核苷酸掺入 DNA 中所需的酶量 。
使用方法：
1. PCR反应体系
试剂 | 体积 |
10×Taq Buffer(Mg2+ Plus) | 5μL |
dNTP Mixture(2.5mM each) | 4μL |
Template DNA | ＜500 ng |
Primer F | 0.2-1.0 μM |
Primer R | 0.2-1.0 μM |
Taq DNA Polymerase(5U/μL) | 0.2μL |
ddH2O | Up to 50μL |
2. PCR反应参数的设置以扩增 1Kb 目的片段为例
步骤 | 温度℃ | 时间 | 循环数 | 预变性 | 95 | 5min | 1 | 变性 | 95 | 30s | 25-35 | 退火 | 55~55(depending on primer Tm) | 30s | 延伸 | 72 | 1min/kb | 最后延伸 | 72 | 10min | 1 | Hold | 4 | ∞ | 1 |
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2.1 PCR 反应的设置需根据模板、引物、PCR 产物的长度和 GC 含量等条件的不同设定不同的 PCR 反应条件包括温度、时间和循环数等。
2.2 STEP4(延伸)的时间设置需根据 PCR 产物的长度进行设置，通常每 kb 产物的延伸时间为 1min。例如PCR 产物的长度为 1kb，则延伸时间可以设置为 1min，PCR 产物的长度为 2kb，则延伸时间可以设置为 2min，以此类推。
2.3 对于初次进行的 PCR，为尽量确保可以扩增出预期的 PCR 产物，可以把循环数设置为 35。对于需进行半定量或定量的 PCR 反应循环数一定要进行适当优化，使 PCR 反应没有达到平台期。
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关键字： DNA polymerase I; thermostable; DNA-directed DNA polymerase; Taq DNA 聚合酶; 不含DNA的Taq DNA 聚合酶; TAQ DNA 聚合酶
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