本实验以银杏籽为原料,用乙醇提取银杏籽中的银杏酸,用石油醚进一步提取乙醇提取物。方法与结果:研究银杏酸的纯化过程,采用HPLC和LC-MS联用法分析和检测银杏酸的组成和含量。以2种细菌和4种真菌为试验菌株,分别检测银杏酸的抗菌活性,并分别测定最低抑菌浓度(MIC)。结果表明,以石油醚、乙醚、甲醇为89:1:11体系,以1.2 mL/min的速度,硅胶柱层析纯化效果更好。HPLC和LC-MS分析表明,银杏籽中的银杏酸主要由银杏酸C13:0、C15:1、C17:2、C15:0、C17:1组成。脱脂银杏粉中银杏酸的含量按C13:0、C15:1、C17:1分别为0.11 g/kg,银杏酸C13:0、C15:1、C17:1分别为0.013、0.042、0.055 g/kg。结论:银杏酸对细菌大肠杆菌和枯草芽孢杆菌,以及真菌青霉菌、紫青霉菌、卡门培尔青霉菌和黑曲霉菌具有较广的抗菌谱。银杏酸对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和青霉菌的MIC分别为7.5、15、25 mg/mL。
Pseudodactylogyrus 是水产养殖的欧洲鳗鳗的重要单基因寄生虫,可引起严重的鳃病变。 本研究采用生物测定引导的分离方法,研究了银杏叶粗提取物、组分和胸膜外化合物在体内条件下对假指趾病的影响。方法与结果:采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4种溶剂提取银杏叶胸膜外。其中,只有石油醚提取物显示出较强的活性,因此,使用各种色谱技术进行进一步的分离和纯化。通过比较光谱数据(IR、NMR 和 EI-MS)与文献值银杏酸 C13:0 和 C15:1,鉴定出两种显示出有效活性的化合物。发现它们在 2.5 mg l- 1 和 6.0 mg l- 1 浓度下 100% 有效,ED50 值分别为 0.72 mg l- 1 和 2.88 mg l- 1。在为期5天的安全性测试中,银杏酸C13:0和C15:1分别在浓度高达10.0和18.0 mg l-1时对健康幼鳗是安全的。结论:这两种化合物具有潜在的结果,可以作为植物来源的抗寄生虫药来控制假指趾病。
研究了银杏叶片的体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法和结果:黄叶和绿叶甲醇提取物的抑制活性分别为13.8 μg和40.1 μg mL(-1)。用正己烷、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行溶剂-溶剂萃取,将每种甲醇提取物分离成各自的馏分。正己烷组分(在绿叶和黄叶甲醇提取物中)表现出高α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50值分别为13.6和13.4 μg mL(-1)。通过硅胶柱层析进一步分离正己烷馏分,得到最活跃的馏分,鉴定为银杏酸C13:0和混合物(C13:0、C15:0、C15:1、C17:1和C17:2)。银杏酸C13:0的α-葡萄糖苷酶抑制活性最高。结论:这是第一项成功分离银杏酸作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究。
银杏叶叶和银杏叶中的银杏酸(GAs)代表了一种新型的软体动物杀虫剂。迄今为止,观察到的软体动物杀灭活性的机制在很大程度上仍然未知。由于银杏酸C13:0(GA-C13:0)有效抑制了蜗牛的移动性,我们研究了该化合物与氯硝柳胺相比对线粒体功能和基因表达的影响。方法和结果:采用透射电子显微镜(TEM)检测GAs诱导的蜗牛线粒体损伤,并使用实时荧光定量PCR对5种线粒体酶进行基因表达谱分析。GA-C13:0 被发现对蜗牛线粒体有显着影响,并伴有明显的超微结构变化。此外,GA-C13:0 还被发现抑制四种线粒体酶的基因表达,包括细胞色素 c 氧化酶、三磷酸腺苷 (ATP) 合酶、细胞色素 b 和二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH) 脱氢酶。相比之下,氯硝柳胺对线粒体功能和基因表达没有表现出这种影响,这表明GA-C13:0和氯硝柳胺的杀软体动物活性不同。结论:我们的研究结果表明,蜗牛线粒体是银杏酸杀软体动物活性的潜在靶标。
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王玲