本研究旨在探讨异叶素B(HB)对ECA-109人食管癌细胞粘附和侵袭的影响,并探讨其可能涉及的机制。方法和结果:进行细胞计数试剂盒 8 测定以确定细胞活力。用 HB(0、10、25 和 50 μM)处理 ECA-109 细胞 24 小时后测定细胞粘附和侵袭。采用Western blot分析法检测磷酸化(p-)ATK和对磷酸肌醇3-激酶(PI3K)水平,以及β-catenin蛋白水平。采用逆转录-定量聚合酶链反应和Western blot分析分别检测E-cadherin、波形蛋白、蜗牛、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9的mRNA和蛋白表达水平。HB(10、25 和 50 μM)以剂量依赖性方式显着抑制 ECA-109 人食管癌细胞的粘附和侵袭。p-ATK、p-PI3K和β-catenin的表达水平明显降低。HB处理的ECA-109细胞中E-cadherin的表达水平升高,而蜗牛、波形蛋白、MMP 2和MMP 9的表达水平显著降低。此外,HB抑制了PI3K激活肽在ECA-109细胞中诱导的粘附和侵袭,并调节了蛋白表达水平。结论:HB 通过介导 PI3K/AKT/β-catenin 通路和调控粘附和侵袭相关基因的表达水平,有效抑制了人食管癌细胞的粘附和侵袭。
Heterophyllin B (HB) 是从 Pseudostellaria heterophylla 中分离得到的环状八肽。《中国药典》将异叶素B作为评价异叶假单胞菌的质量控制指标。方法和结果:建立并验证了一种快速、灵敏的 LC-ESI-MS/MS 方法,用于分析大鼠血浆中异叶素 B。样品制备包括固相萃取步骤,用于去除干扰物并预浓缩目标分析物 Heterophyllin B 和内标 N-乙酰半胱氨酸,然后通过 MS/MS 检测进行色谱分析。使用Hypersil GOLDTM C18色谱柱和含有10 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的甲醇-水(60:40,v/v)混合物作为流动相,分离Heterophyllin B和N-乙酰半胱氨酸。在选定的反应监测模式下,对测定步骤进行了优化,以实现大鼠血浆中异叶素 B 的高选择性和灵敏定量。测定内和批间精密度(作为相对标准偏差)为≤9.1%,准确度在92.6%至102.7%之间。该验证方法成功应用于量化大鼠尾部静脉注射 2.08、4.16 和 8.32 mg/kg 异叶素 B 后长达 7 小时的异叶素 B 浓度。结论:LC-MS/MS方法鉴定了异叶素B及其所研究类似物的相关药代动力学参数。
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王玲