Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A
——Clontech/Takara 酵母菌/真菌转化实验选择性抗生素/酵母单杂交/双杂交研究
搜索关键词：
选择性抗生素；酵母菌转化系统【酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌转化系统【构巢曲霉、黑曲霉】；酵母单杂交/双杂交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突变基因；
基本描述：
金担子素A（Aureobasidin A，AbA），也称为短梗霉素A，一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106的环酯肽类抗真菌抗生素，在较低浓度（0.1-0.5μg/ml）下即可对酵母菌产生毒性，对该抗生素敏感的真菌包括：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillus niger.）。金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成，导致鞘脂类物质的合成量不足，细胞膜破裂，进而杀死菌株。研究发现，来自酿酒酵母菌的AUR1和构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性，都能够编码IPC合成酶，对这两种基因的点突变，也都赋予菌株对AbA产生很强的抗性，比如：突变基因AUR1-C。
AbA用作选择性标记的应用和优势：
1. 酵母转化研究中，金担子素A（AbA）是一种非常有效的选择性标志；
2. 使用上基本不需优化条件，且创造极低背景。AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子，兼容于携带相应抗性的酵母单杂交/双杂交系统，并提供良好的筛选结果。
携带AbA抗性基因（AUR1-C）的商业化载体：
1. 大肠杆菌-酵母菌穿梭载体/大肠杆菌-曲霉穿梭载体（shuttle vector）
简单描述：pAUR载体系统包含六种大肠杆菌-酵母菌穿梭载体，每一种特别改造用于酿酒酵母、粟酒裂殖酵母或者构巢曲霉，这些载体都涵盖一个新型的药物抗性选择性标志（金担子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或丝状真菌具有此抗性。
在酵母细胞内不会自主复制，仅通过重组方法整合进入染色体才能保留在细胞内。染色体整合和酿酒酵母菌转化用载体。含来自酿酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大肠杆菌-酵母菌穿梭载体；
含CEN/ARS区域，在酵母细胞内能自主复制，因此细胞分裂过程能保持稳定。含AmpR和URA3基因（尿嘧啶选择性标记），来自酿酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大肠杆菌-酵母菌穿梭载体；
来自酿酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。蛋白表达载体和来源于pAUR112的大肠杆菌-酵母菌穿梭载体；含用于酵母细胞蛋白表达用的ADH1持续性启动子；
Vector for marker removal in S. cerevisiae；大肠杆菌-酵母菌穿梭载体；
含来自粟酒裂殖酵母的AbA抗性基因-aur1R；蛋白表达载体，含粟酒裂殖酵母中发挥作用的CMV持续性启动子；
构巢曲霉内能够自主复制；来自构巢曲霉的AbA抗性基因-aurAr以及AMA1区域（复制起始区）和AmpR；大肠杆菌-曲霉穿梭载体；
2. 酵母报告基因载体（yeast reporter vector）
基本特性：
- 同义名：短梗霉素A
- 分子式：C60H92N8O11
- 分子量：1100 Da
- 纯度：≥95%
- 熔点：155-157℃
- 溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）
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或直接参考Clontech官网：http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Aureobasidin?sitex=10022:22372:US
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上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
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