产品描述
2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有HieffTM HotStart Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,可以高通量操作并提高实验结果的重现性。HieffTM HotStart Taq DNA Polymerase是经过配体修饰的热稳定 Taq DNA Polymerase,该配体可以随温度变化来调节 DNA 聚合酶活性。在室温下酶活性被完全封闭,经 95℃加热后活性才被释放。HieffTM HotStart DNA Polymerase 的激活时间只需要 2-3 min,兼容现有的 PCR 程序。本产品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增,可以有效地进行基因分型实验。
产品应用
本产品主要应用于小鼠基因型鉴定。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
PCR反应体系(50 μL)
【注】:针对不同模板的反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。
PCR扩增程序
【注】:
1)退火温度和时间:退火温度推荐使用50-60℃。退火时间推荐设置为30 sec,可以在20-30 sec内调节。可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30-60 sec/kb。
3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
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上海翊圣生物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd.)成立于2009年,是专注于酶制剂和抗原抗体开发的高新技术型企业,致力于为生命科学研究领域内的科研客户及精准医疗相关行业的工业客户提供高质量的产品和优质的服务。
公司现阶段建设有分子、蛋白、细胞和免疫四大技术平台,涵盖全面丰富的产品线,包括PCR、qPCR、高保真DNA聚合酶、逆转录相关制剂、克隆试剂盒、高通量测序MaxUP系列DNA和RNA建库试剂盒、细胞培养、支原体检测/预防/去除试剂,以及体外诊断相关的酶原料、试剂和磁珠等3000多种试剂和试剂盒,服务于全国各级高校、研究所、医院、第三方检测机构、生物医药公司等2.5万家客户,助力发表高质量SCI论文1000余篇。
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