产品描述
动物组织直接PCR试剂盒是一款可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒,适应性广、稳定性强。试剂盒采用独特的裂解缓冲液体系,可以快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA,不需要除去蛋白、RNA等,即可将释放出的基因组DNA作为模板直接用于PCR反应。此外,样品使用量少,低至5 mg动物组织即可进行实验。
本试剂盒中提供的2× Tissue Master Mix(With Dye)具有很强的扩增兼容性,能直接以待测样品裂解液为模板,进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合液,包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分,大大简化操作过程,降低污染几率。
该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等。
产品组分
a)2× Tissue Master Mix(With Dye):包含Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等,产品已混合溴酚蓝染料(不含SDS),PCR产物可以直接进行电泳。
运输方法
冰袋运输。
保存方法
1. 试剂10184-A【Buffer AL】,在常温干燥条件下,可保存12个月,如需保存更长时间可置于4℃。低温保存,易出现沉淀,可平衡至室温或37℃水浴10 min,待沉淀溶解后,混匀使用。
2. 试剂10184-B【Protease】,具有独特配方,为保证其更好的活性和稳定性,建议4℃保存,切勿置于-20℃。
3. 试剂10184-C【2× Tissue Master Mix(With Dye)】,-20℃保存,避免反复冻融。
操作方法
样品基因组DNA释放
1. 在离心管中加入100 μL Buffer AL,4 μL Protease,轻轻涡旋混匀。
【注】:Buffer AL与Protease混合后尽快使用,不宜长期保存。
2. 取5-10 mg动物组织,置于上述离心管中,轻轻涡旋混匀。
【注】:组织应尽量剪碎,以便酶解反应更顺利进行。
3. 65℃孵育10-30 min,然后95℃处理5 min。
【注】:65℃孵育,一般10 min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解,可将时间延长至30 min。组织块不需完全酶解,残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
4. 12000 rpm离心5 min。
5. 将上清转移至新的离心管,4℃或-20℃保存或直接用于PCR扩增。
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上海翊圣生物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd.)成立于2009年,是专注于酶制剂和抗原抗体开发的高新技术型企业,致力于为生命科学研究领域内的科研客户及精准医疗相关行业的工业客户提供高质量的产品和优质的服务。
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