人多能干细胞消化液
产品基本信息
产品简介
人多能干细胞消化液是埃泽思生物科技有限公司(Applied CellTM)自主研发的一款不含蛋白消化酶、专业应用于人多能干细胞消化传代的产品。本产品为温和高效型消化液,限度减少对干细胞消化损伤,传代存活率高,且消化时间3-5min即可,和传统细胞传代方法相比,简化细胞传代过程。本产品生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。
产品特性
温和高效,传代存活率高。
简化细胞传代过程,省去挑克隆的操作。
相关产品
人多能干细胞培养基(Applied CellTM: Cat. no.AC-1001000)
Advance人多能干细胞培养基(Applied CellTM: Cat. no.AC-1001001)
人多能干细胞分化培养基(Applied CellTM: Cat. no.AC-1001002)
即用型基质胶(Applied CellTM: Cat. no.AC-1001007)
Serum-Free干细胞冻存液(Applied CellTM: Cat. no.AC-1001011/AC-1001012)
操作方法(此次操作以6孔板为例)
清洗:准备预传代细胞,贴边缓慢加入预热2 mL PBS缓冲液并轻轻晃动,然后沿培养皿边缘吸去PBS缓冲液。
消化:在6孔板中加入2 mL消化液使之覆盖皿底,并置于CO2培养箱中孵育2~5 min;
注意:细胞密度不同,消化时间略有调整,在显微镜下观察到大部分克隆边缘以及克隆内部细胞间出现间隙,即刻吸掉消化液停止消化。
吹打:吸掉人多能干细胞消化液后,立刻加入平衡好的 2mL干细胞培养基,用移液枪呈扇形吹打6孔板底,吹吸次数保持在3~5次,使皿底贴附的干细胞集落脱落,轻柔缓慢吹吸混匀,制成干细胞悬液,并将其转移到15mL离心管中;
注意:吹打细胞要轻柔,吹打次数在3~5次为宜,尽量避免形成单细胞。如有少量细胞无法从皿底脱落,属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落,需延长消化时间。
干细胞消化后,可以继续进行传代接种,也可以将干细胞进行冻存,步骤如下:
接种:1000 rpm/min离心3 min,弃上清,用室温平衡好的干细胞培养基缓吹打重悬细胞5-10次,并转移至包被好的培养板中,每孔2ml培养基。接种后显微镜下观察干细胞密度以及细胞团块大小,一般4个细胞以上的团块较合格,水平十字轻轻晃动6孔板,使细胞分布均匀。并置于CO2恒温培养箱培养,第2天观察细胞贴壁情况,每24h换液一次。
冻存:1000 rpm/min离心3 min,弃上清,加入2mL Serum-Free干细胞冻存液(AC-1001011/AC-1001012),重悬3~5次后,将其加入到2mL冻存管中(注意:冻存液即用即拿,及时放回4℃冰箱。)。在冻存管上标记冻存细胞种类、时间、操作者及细胞批次,冻存管置于-80℃冰箱过夜,24h后将其转至于液氮中进行长期保存。
质量控制
关键字: 多能干细胞、多能干细胞消化液;
上海埃泽思生物科技有限公司( Applied Cell?)专注于治疗用及生产用细胞培养产品研发与生产,目前公司产品已经涵盖干细胞、免疫细胞培养,冻存以及分离等领域。为保证产品标准化、一致性,我们对所有产品进行严格的原料筛选及生产控制。目前,我公司已通过ISO9001:2015质量管理体系认证。除提供产品支持,本公司的技术团队还可为您提供及时有效的技术支持、技术咨询,以及与您探讨感兴趣的科学问题和解决方案。最终我们希望通过高品质的产品及服务,不断推动细胞治疗、再生医学以及药物发展与创新,愿我们早日成为您在研发科研及应用领域的忠诚合作伙伴。
公司愿景:
我们努力成为中国细胞培养领域最顶尖产品与服务提供商。
公司使命: