名称 Soil Protein Extraction Kit / 土壤蛋白提取试剂盒 规格 50T | 100T 存储 蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液室温保存。有效期:一年。 试剂组分 Component 50 assay 100 assay Reagent A: Soil Protein Extract(土壤蛋白提取液) 50ml 100ml Reagent B: Protease Inhibitor Cocktail(蛋白酶抑制剂混合物) 100ul 200ul 土壤蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放各类水溶性和脂溶性蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。 蛋白酶抑制剂混合物:包含7种独立的蛋白酶抑制剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA。 【注意】 1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。 2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。 产品简介 Phygene土壤蛋白提取试剂盒适用于从各种红壤、棕壤、褐土、黑土、栗钙土、漠土、盐碱土、岩性土和高山土等中提取土壤中总蛋白。提取过程简单方便,可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。 本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳,请使用Phygene相对应的试剂盒。 产品特点: 1、使用方便,将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。 2、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。 3、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。 4、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 试剂盒以外自备试剂和仪器: 1)移液器、吸头 2)离心机及离心管 3)涡旋振荡器 4)冰箱,冰盒 使用参考 使用前注意事项: a. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 b. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 c. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。 d. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 1. 提取液制备:每 1ml 冷的蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。 2. 土壤经干燥过筛,除去植物根系等杂质,置于研钵中研磨成细小均匀颗粒。 3. 每 0.5g 研磨后的土壤[1]中加入1ml 冷的土壤蛋白提取液(提取液体积约土壤体积的3 倍左右),置于涡旋混合仪上振荡1 分钟, 使其充分混合均匀,混匀后,于摇床中在4℃条件下振荡15-20 分钟。 4. 在 4℃,14000rpm 条件下离心15 分钟。 5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到土壤总蛋白。 6. 将上述蛋白提取物定量[2]后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验[3]。 【注释】 [1] 土壤数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。 [2] 建议用 BCA 法进行蛋白定量。 [3] 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。 注意事项 1. 本试剂盒仅供科学研究使用。 2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。 4. 使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。 5. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
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