产品简介 传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶,其中去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。Phygene 细菌膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学方法的高产膜蛋白提取试剂盒。细菌膜蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取膜蛋白,可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,可用于各种下游实验。
产品特点
1、 使用方便,从细菌中提取蛋白不需经过超声破碎等前处理。 2、 将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。 3、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。 4、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。 5、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 6、 本品可用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
7、 本品不含 EDTA,可以用于金属螯合层析等下游应用。
注意事项 1. 本试剂盒仅供科学研究使用。 2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 3. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 5. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。 6. 使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。 7. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
常见问题 (一)蛋白浓度低? 膜蛋白浓度较低,需要尽可能加大细胞上样量。处理部分组织样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。 (二)用什么方法定量蛋白? 建议用 BCA 方法。不建议使用 Bradford 法,因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组分,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用 Bradford 法定量。 (三)提取的蛋白具有活性吗? 本试剂盒不含有离子型去垢剂组分,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。
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