一管式反转录试剂盒(RT MIX)
产品及特点 本产品是一管式反转录预混 Mix,内含反转录链合成所需的所有试剂(MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应 Buffer 等),用户只需加入模板 RNA 和 RNase-Free 水即可进行反应。本产品特点如下:
1. cDNA 的合成更加方便,用户只需准备模板和水即可进行反应。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 效率高,特殊优化的 oligo dT 和 N6 随机引物配比,反转录效率高。
4. 速度快,只需 42℃,20 分钟即可完成 cDNA 链的合成。
5. 能够用于 GC 含量高,二级结构复杂的 RNA 模板,合成 cDNA 片段长度可达 12kb。
6. 兼容性好,合成的 cDNA 可直接用于荧光定量 PCR 反应,灵敏度高、稳定性好。
一管式反转录试剂盒(RT MIX)
规格及成分 成 份 编 号 10 次包装 50 次包装
2×RT MasterMix 170403 0.1 mL 0.5 mL
RNase-Free 水 80403 1 mL 1 mL
使用手册 1 份
一管式反转录试剂盒(RT MIX)运输及保存 低温运输,-20℃保存, 有效期一年。
自备试剂 RNA 模板。
使用方法1. 解冻后颠倒轻弹混匀各组分,以 20 uL 体系为例,按下表加入(2×RT Master Mix很粘稠,取用前请短暂离心,并避免吸头外壁沾附损失):
2×RT MasterMix 10 uL
Total RNA/mRNA 模板(自备) 50 ng-2 ug/5-200ng
补 RNase-Free 水到 20 uL
注意:对亍二级结构很复杂的 RNA 模板,推荐使用变性步骤,即在操作步骤之前,将模板 RNA 在 65℃孵育 5 分钟后迅速转移到冰上,再进行下一步操作。
2. 轻轻混匀,42℃孵育 20 分钟进行反转录反应。
注意:对亍二级结构复杂或者 GC 含量高的模板,可以提高温度至 50℃,以增强反转录效率。
3. 85℃加热 5 秒钟灭活反转录酶置冰上备用(更长时间保存请置于-20℃)。
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