通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)
产品及特点 本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒,可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点:
1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2. 可以扩增基因组达上万倍,具有高产量和高保真性的特点。
3. 可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞,真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
5. 产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异,SNP,STR)等。
6. 本产品只能用于科研。
通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)
规格及成分 成 份 编 号 十孔盒包装
WGA 溶液 A 100941a 250 μL(白盖)
2×WGA 溶液 B 100941b 300 μL(蓝盖)
phi 29 DNA 聚合酶(10U/μL) 100941c 25 μL(红盖)
使用手册 100941sc 1 份
自备试剂 超纯水(无 DNA 和 DNase 污染)
通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)运输及保存 低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
使用方法本产品适用于纯化好的基因组DNA。
一、模板变性
1. 在PCR塑料管中加入9μL WGA溶液A,加入1μL纯化好的基因组DNA模板(DNA含量在10ng-100ng之间)。
2. 在PCR仪器上95℃3分钟变性模板DNA。注意:必须打开热盖。
3. 冰上放置待用。
4. 加入10 μL 2×WGA溶液B,轻柔吹打混匀。
5. 加入1 μL phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
6. 30℃保温10-12小时。使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
7. 65℃保温20分钟使phi29 DNA聚合酶彻底灭活,然后-20℃长期放置或立即
使用。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以强烈推荐反应结束后65℃保温20分钟以将酶彻底灭活以免其干扰后续反应或长期保存时其降解DNA。
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