检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗猪IL-6抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-6与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。
检测类型:双抗夹心法
形式:预包被96孔板
检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆
上样量:100ul
试剂盒组分:
预包被96孔板、标准品、抗猪IL-6检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(A、B)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。
灵敏度:1.8 pg/mL
检测范围:125 - 8,000 pg/mL
回收率范围:70-114%
保存方法:2-8℃
标准曲线图
背景:
白细胞介素-6(IL-6) 是一个具有α螺旋结构,22-28kD 的磷酸化和不同程度糖基化的多功能细胞因子,它在疾病急性期反应、 炎症、 造血、 骨代谢以及癌症恶化等方面起重要作用。成熟的小鼠 IL-6 有 187 个氨基酸,与人和大鼠 IL-6 分别有 42%和 85%同源性。IL-6 内部的选择性剪接而产生多种异构体,有些剪接体表现出拮抗特性。已知表达 IL-6 的细胞,包括 CD8+ T 细胞、 成纤维细胞、 滑膜细胞、 脂肪细胞、 成骨细胞、 巨核细胞、 内皮细胞(在内皮素的影响下) 、 交感神经元、 大脑皮质神经细胞、 肾上腺髓质嗜铬细胞、 视网膜色素细胞、 肥大细胞、 角质形成细胞、 朗格汉斯细胞、 胎儿及成人星形胶质细胞、 中性粒细胞、 单核细胞、 嗜酸性粒细胞,结肠上皮细胞、 B1 B 细胞和胰岛β细胞。IL-6 的产生通常是在糖皮质激素、 儿茶酚胺和第二性类固醇的控制下,一般与细胞激活相关。正常人血液中的 IL-6 在 1 pg/mL范围内,在月经期略有升高、 在某些癌症的中晚期中度增高、 在大型手术后有显著升高。 IL-6 通过细胞表面受体引发细胞信号,该受体是由配体结合亚单位(IL-6 受体) 和信号转导亚单位 gp130 组成的异二聚体复合物。IL-6 结合到 IL-6 受体上,引发了 IL-6受体与 gp130 的结合及 gp130 的二聚体化。gp130 也是 CLC、 CNTF、 CT-1、 IL-11、IL-27、 LIF 和 OSM 受体的组成部分。可溶性 IL-6 受体是由选择性剪接和蛋白酶切割产生的。通过反式信号转导机制,可溶性 IL-6 和 IL-6 受体复合可引发表面缺乏 IL-6 受体,但表达 gp130 细胞的应答。IL-6 受体的表达主要局限于肝细胞、单核细胞、 淋巴细胞和静息淋巴细胞,由于 gp130 分子表达非常广泛,反式信号转导实现了更广泛的细胞类型对 IL-6 的响应。可溶性 gp130 剪接体阻止了 IL-6/IL-6R的反式信号转导,但不能阻止其它细胞因子利用gp130分子作为共同受体的信号转导。 IL-6 与肿瘤坏死因子α(TNF-α) 和 IL-1 一道,所引起的急性炎症反应,在发热和肝脏急性炎症反应中几乎起着独一无二的作用,它在从急性炎症到获得性免疫或者慢性炎性疾病的转化中也发挥重要作用。IL-6 失调可促进慢性炎症,如肥胖、 胰岛素抵抗、炎症性肠道疾病、炎性关节炎以及败血症,往往涉及 IL-6 的反式信号转导。在转化生长因子 TGF-β 存在的情况下,IL-6 在幼稚型 T 细胞相 Th17 炎性细胞分化的过程中起重要作用。IL-6 调节骨吸收,通过促进 Th17 炎性细胞的活性,是类风湿性关节炎中造成炎性关节损伤的主要因素。IL-6 参与动脉粥样硬化斑块的形成和非稳定性。然而,IL-6 也有抗炎症作用,如体育锻炼时骨骼肌分泌 IL-6,它作为造血干细胞的生长因子促进造血、诱导 B 细胞成熟为浆细胞、多发性骨髓瘤细胞的永生。IL-6 也促进,但可能不会启动其它炎症相关的癌症发生,如结肠炎相关癌症。
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