AD-293 Cell:人胚肾细胞系

"AD-293 Cell:人胚肾细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
WB-F344细胞系相关产品：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
Hs 274细胞系相关产品：CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
TE11细胞系相关产品：Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
H1694细胞系相关产品：beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
AD-293 Cell:人胚肾细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HBL 100细胞系相关产品：RKOE6细胞、HCT 8细胞、ZR751细胞
Hs68细胞系相关产品：DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
MC 3T3-E1细胞系相关产品：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
COLO 320 HSR细胞系相关产品：DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞
细胞生长特性：贴壁生长
AD-293 Cell:人胚肾细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SK-Col-1细胞系相关产品：H-1838细胞、NIE-115细胞、TYK-nu细胞
HO1-N-1细胞系相关产品：143TK-细胞、NCIH847细胞、YD15细胞
hTERT RPE-1细胞系相关产品：QGY-7703细胞、CCRFCEM细胞、G519细胞
UMUC1细胞系相关产品：HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞
BXPC3细胞系相关产品：ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞
HO1-N-1细胞系相关产品：143TK-细胞、NCIH847细胞、YD15细胞
SV40-HCEC细胞系相关产品：IOSE-Mar细胞、Capan 2细胞、Nthy ori 3.1细胞
AD-293 Cell:人胚肾细胞系
WM266mel细胞系相关产品：Hepatoma-22细胞、HEK-293细胞、CEMC1细胞
MOLT-16细胞系相关产品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、HT 144细胞、NCIH1437细胞
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞
HCC1937细胞系相关产品：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
Hs746-T细胞系相关产品：DU 4475细胞、NCI-H2126细胞、KY-270细胞
A-20细胞系相关产品：EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
LS174细胞系相关产品：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
FRTL-5细胞系相关产品：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
A-10细胞系相关产品：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
A-10细胞系相关产品：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
COV-434细胞系相关产品：HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞
Z310细胞系相关产品：NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
Hs1.Tes细胞系相关产品：hCMEC/D3细胞、UT7细胞、RPTEC/TERT 1细胞
KPL1细胞系相关产品：HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
B10BR细胞系相关产品：NCI-H838细胞、OVCA5细胞、IPEC-1细胞
Transformed Human Liver Epithelial-2细胞系相关产品：OKT3细胞、MOLM-13细胞、RAW264细胞
HCE细胞系相关产品：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
DMS-273细胞系相关产品：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞
MGHU1细胞系相关产品：WM2664细胞、MDA-MB-415细胞、RC-K8细胞
STC-1细胞系相关产品：Tu-686细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞、NIH/3T3细胞
hRMECs细胞系相关产品：HSAS4细胞、LSECs细胞、NCI-H1672细胞
hRMECs细胞系相关产品：HSAS4细胞、LSECs细胞、NCI-H1672细胞
P388D1细胞系相关产品：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞
SNU354细胞系相关产品：NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
NCI-H1568细胞系相关产品：MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
H716细胞系相关产品：Colo16细胞、BRL 3A细胞、NCI-H1666细胞
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
SVEC 4-10细胞系相关产品：H-711细胞、RMG-1细胞、GLC-82细胞
KE39细胞系相关产品：HFT8810细胞、ChaGo K-1细胞、HBE 135-E6/E7细胞
Hs-675-T细胞系相关产品：HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞
Cor L88细胞系相关产品：NCI-H1573细胞、SW-900细胞、CV1细胞
MCCAR细胞系相关产品：TGHAVSMC细胞、U266 B1细胞、H1437细胞
AN3细胞系相关产品：Kasumi 1细胞、alpha TC1 clone 6细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞
CESS细胞系相关产品：EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
H1522细胞系相关产品：Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
OCI AML4细胞系相关产品：CCRF细胞、H-1770细胞、T-HEECs细胞
K 562细胞系相关产品：Walker/LLC-WRC 256细胞、RPMI2650细胞、H-1568细胞
NCI-H-295细胞系相关产品：KM932细胞、LN-229细胞、NCCIT细胞
NCI-SNU-398细胞系相关产品：SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
NCI-SNU-398细胞系相关产品：SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
HS688AT细胞系相关产品：OPM2细胞、COV 504细胞、Adeno 293细胞
NMCG1细胞系相关产品：HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞
AD-293 Cell:人胚肾细胞系
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
NCI-841细胞系相关产品：AML-2细胞、Rat1细胞、LS180细胞
MyLa2059细胞系相关产品：SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞
MHCC97细胞系相关产品：SK N SH细胞、BPH1细胞、LN299细胞
MV-1-Lu细胞系相关产品：BIU-87/Adr细胞、NOZC-1细胞、T 98 G细胞
G422细胞系相关产品：SKGT2细胞、B16F1细胞、H-2170细胞
HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
HIBEpiC细胞系相关产品：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞
YD38细胞系相关产品：AG06814-J细胞、OVCAR-8/ADR细胞、143B细胞
RSC-364细胞系相关产品：NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
SU-DHL-6细胞系相关产品：SL-1细胞、H2227细胞、B-CPAP细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品：HFL-1细胞、BT474细胞、OsACL细胞
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