"B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：黑色素瘤；雄性；C５７BL/６
BNCL2细胞系相关产品：H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
H.Ep. #2细胞系相关产品：H1792细胞、Hs 739.T细胞、COV-362细胞
NCI-H1869细胞系相关产品：LS-1034细胞、ssMCF7细胞、TGHAVSMC细胞
Ha Fe细胞系相关产品：HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Anip-973细胞系相关产品：D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞
NCI-H747细胞系相关产品：C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞
TCC-PAN2细胞系相关产品：Suzhou Human Glioma-44细胞、LMH细胞、IOSE-Van细胞
Human Liver-7702细胞系相关产品：JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞
IA-LM细胞系相关产品：CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞
细胞生长特性：贴壁
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤细胞系
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
细胞形态特性：详见细胞说明书
Hs840_T细胞系相关产品：LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
Molm 14细胞系相关产品：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞
LS-180细胞系相关产品：COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
C-Lu-65细胞系相关产品：CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
NTera 2细胞系相关产品：N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
AMC-HN8细胞系相关产品：Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
U-2OS细胞系相关产品：RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤细胞系
786-O细胞系相关产品：P-19细胞、Y3M细胞、KU812-F细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞系相关产品：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞
Murine Carcinoma-38细胞系相关产品：SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞
NCIH520细胞系相关产品：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
HUSMC细胞系相关产品：H-847细胞、Hep G2细胞、COLO 320F细胞
PLC-8024细胞系相关产品：aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞
Lu99A细胞系相关产品：B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞
DCS细胞系相关产品：GM16136细胞、KMS-26细胞、DU_145细胞
DCS细胞系相关产品：GM16136细胞、KMS-26细胞、DU_145细胞
AU565细胞系相关产品：BV2细胞、COLO-741细胞、RL-952细胞
GM03320D细胞系相关产品：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
EJ 138细胞系相关产品：IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞
KMS-18细胞系相关产品：MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞
NTera2/D1细胞系相关产品：PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
GCT0404细胞系相关产品：HS766T细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、SL1细胞
PT-K75细胞系相关产品：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
HME-1细胞系相关产品：ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞
SNU119细胞系相关产品：MDA1386细胞、MUTZ-3细胞、CL1-0细胞
PATU-S细胞系相关产品：SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞
Mc Coy细胞系相关产品：FHs74 Int细胞、526细胞、KASUMI1细胞
HEK-293-EBNA细胞系相关产品：32Dcl3细胞、Bac 1.2F5细胞、BALB/3T3 clone A31细胞
K562/ADP细胞系相关产品：SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞
COV362细胞系相关产品：SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞
MIA Paca2细胞系相关产品：HUT-28细胞、rRTEC细胞、BL2141细胞
WPE-int细胞系相关产品：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞
Hs 822.T细胞系相关产品：SK-N-MC细胞、CV 1细胞、GCT0404细胞
Glioma 261细胞系相关产品：A431细胞、KYSE450细胞、WM 115细胞
HR-8348细胞系相关产品：MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞
CAL-62细胞系相关产品：mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞
MDA468细胞系相关产品：QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞
HR-1细胞系相关产品：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
MIA Paca2细胞系相关产品：HUT-28细胞、rRTEC细胞、BL2141细胞
Panc3_27细胞系相关产品：PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞
SO-Rb 50细胞系相关产品：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞
RKO_AS45细胞系相关产品：NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
PANC-08-13细胞系相关产品：SUM102细胞、JROECL21细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞
Chang Cells细胞系相关产品：Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞
DOK细胞系相关产品：GM12878细胞、Nthy ori 3.1细胞、NB-19细胞
Madin-Darby Bovine Kidney细胞系相关产品：C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞
EAC-E2G8细胞系相关产品：OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤细胞系
HEK/EBNA细胞系相关产品：K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞
Keio University-19-19细胞系相关产品：SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞
HT-1080细胞系相关产品：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞
HSC（Human Schwann）细胞系相关产品：CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
MES23.5细胞系相关产品：NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
UPCISCC090细胞系相关产品：LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、2PK-3细胞、3T3F442A细胞
RL细胞系相关产品：SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞
H28细胞系相关产品：H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
BHP10-3细胞系相关产品：A375-SM细胞、MES23.5细胞、SKGT2细胞
PLB-985细胞系相关产品：NCI-H676细胞、CAL 12细胞、KMH2细胞
Ha Fe细胞系相关产品：HCC1008细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HDF-a细胞
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