B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤细胞

"B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤细胞

细胞背景资料：黑色素瘤；雄性；C５７BL/６

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

IMR-32细胞类似产品：：BpRcl细胞、SKNF1细胞、Hs729T细胞

LLC-PK1细胞类似产品：：TR146细胞、CCRF-CEM/S细胞、ME-180细胞

JTC-39细胞类似产品：：H460细胞、Reuber H35细胞、CTLL(2)细胞

PC3M-1E8细胞类似产品：：CEMx721.174.T2细胞、SKCO1细胞、MDAMB436细胞

SJSA-1细胞类似产品：：Hs 606细胞、NCI-SNU-407细胞、B 95-8细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

MCA 38细胞类似产品：：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞

231-luc细胞类似产品：：BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞

TEV-1细胞类似产品：：4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞

Hs-274-T细胞类似产品：：GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

MCA 38细胞类似产品：：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞

231-luc细胞类似产品：：BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞

TEV-1细胞类似产品：：4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞

Hs-274-T细胞类似产品：：GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞

细胞生长特性：贴壁

细胞系永生化原理介绍：多数正常细胞的寿命是有限的，能传20-100代，但有些细胞，尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞，可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的，在传到12代左右以后可能出现危相，多数细胞在这个阶段死亡了，但少数细胞存活下来，并拥有了更GAO的生长率，成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程，包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作，病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原，可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长，同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性，从而使基因组的不稳定性增加，也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染，足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有：EBV用于淋巴母细胞样细胞；SV40 LT用于黏附细胞，如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。

SW 1783细胞类似产品：：BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞

HS-294细胞类似产品：：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞

CWR22Rv1细胞类似产品：：NCI-H2110细胞、Det 562细胞、HME-1细胞

Pan02细胞类似产品：：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞

MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞类似产品：：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞

Panc-05.04细胞类似产品：：SW 1353细胞、WEHI164细胞、EVSA/T细胞

RBE4细胞类似产品：：B95-8细胞、MCF-12F细胞、NCIH522细胞

PLC-PRF-5细胞类似产品：：NCIH345细胞、DU 4475细胞、207细胞

KYSE-140细胞类似产品：：MDA-MB-453细胞、PCI-SG231细胞、BV-2细胞

293S细胞类似产品：：CL-34细胞、LC1sq细胞、RBL-2H3细胞

B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤细胞

SUD-4细胞类似产品：：CHOK1细胞、H4-II-E-C3细胞、CHL-IU细胞

LN 229细胞类似产品：：RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞

NCI-SNU-601细胞类似产品：：U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞

Hs-729-T细胞类似产品：：RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞

D-283MED细胞类似产品：：293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞

LN229细胞类似产品：：Hs 870.T细胞、H647ell细胞、Swiss3T3细胞

LN229细胞类似产品：：Hs 870.T细胞、H647ell细胞、Swiss3T3细胞

Hep 2细胞类似产品：：RA细胞、HEK 293FT细胞、HOSEpiC细胞

VMCUB-1细胞类似产品：：Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞

Huh-7细胞类似产品：：MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞

CF Pac1细胞类似产品：：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞

LC-1 sq细胞类似产品：：CEM/C1细胞、NCI-H1618细胞、Bac1 2F5细胞

PANC 1005细胞类似产品：：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞

HCC-2218细胞类似产品：：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞

BNL CL2细胞类似产品：：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞

Oregon J-111细胞类似产品：：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞

MUTZ1细胞类似产品：：P3-X63Ag8细胞、Human Epithelioma-2细胞、HITT15细胞

A-1847细胞类似产品：：SL-29细胞、HuTu-80细胞、6-T CEM细胞

SNU-886细胞类似产品：：SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞

NCIH2066细胞类似产品：：CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞

HPF细胞类似产品：：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞

OCI Ly3细胞类似产品：：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞

4T1-A细胞类似产品：：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞

Hs695T细胞类似产品：：Rat Basophilic Leukemia-1细胞、COLO320/DM细胞、SUPM2细胞

NCTC 3960细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、HOS/MNNG细胞、JAR细胞

0V-1063细胞类似产品：：A2780S细胞、QGY 7701细胞、JB 6细胞

MDAMB231细胞类似产品：：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞

HPAF/CD18细胞类似产品：：MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞

RKO-AS45-1细胞类似产品：：HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞

B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤细胞

MOLP2细胞类似产品：：MDA231细胞、Panc2.03细胞、PTK1细胞

NCIH2342细胞类似产品：：RTMC细胞、ssMCF-7细胞、CAL148细胞

GAK细胞类似产品：：RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞

H-2170细胞类似产品：：WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞

EFM192A细胞类似产品：：X63-Ag8-653细胞、HSC（Human Schwann）细胞、SU-DHL-8细胞

H1395细胞类似产品：：MIO-M1细胞、Hs840_T细胞、Caco2BBe细胞

RGCs细胞类似产品：：SK-MES-1细胞、C81-61细胞、3T6 Swiss Albino细胞

Henrietta Lacks cells细胞类似产品：：IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞

EBTr (NBL-4)细胞类似产品：：Hep3B细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、HHL5细胞

Hep 3B2细胞类似产品：：JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞类似产品：：CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞

H676细胞类似产品：：HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞

P30OHK细胞类似产品：：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞

DCS细胞类似产品：：GM16136细胞、KMS-26细胞、DU_145细胞

H-1672细胞类似产品：：PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞

FOXNY细胞类似产品：：B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞

HCC-1428细胞类似产品：：BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞

"