"RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮细胞系 细胞背景资料:肿瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 细胞株 [PubMed: 9214605]. 在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE-1细胞也能形成腺胞[PubMed: 11304724] 并产生PSA。 来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2细胞株(ATCC CRL-11610) [PubMed: 9214605] 和 RWPE2-W99 (ATCC CRL-2853) 细胞株。 另外,用N--N-(MNU)处理RWPE-1,建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。 它们是 WPE1-NA22 (ATCC CRL-2849), WPE1-NB14 (ATCC CRL-2850, WPE1-NB11 (ATCC CRL-2851) 和 WPE1-NB26 (ATCC CRL-2852) 细胞株。 据提供者报道,RWPE-1 细胞株(ATCC CRL-11609)经过检测,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞 ECC 10细胞系相关产品:LC1-Sq细胞、HCC-2218细胞、HEEpiC细胞 HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞 细胞生长:贴壁 RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代。 NCIH1793细胞系相关产品:D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞 MCM细胞系相关产品:P-36细胞、C3H 10T1/2细胞、MFE280细胞 32D/cl3细胞系相关产品:H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞 NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞 ARIP细胞系相关产品:AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 Clone M-3细胞系相关产品:MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞 FBHE细胞系相关产品:NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞 Ly19细胞系相关产品:CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞 SW962细胞系相关产品:A375.S2细胞、HTR-8/SVneo细胞、3T6-Swiss albino细胞 COLO-829细胞系相关产品:A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞 NIH:OVCAR-8细胞系相关产品:X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞 NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 JVM2细胞系相关产品:YES-2细胞、MES-SA/Dx-5细胞、SKHEP1细胞 HGC-27细胞系相关产品:FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞 CHP 100细胞系相关产品:PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞 RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮细胞系 ST细胞系相关产品:HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞 L-M(TK-)细胞系相关产品:GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞 CFSC-2G细胞系相关产品:H2405细胞、CCD-18Co细胞、NK 10a细胞 Hs821T细胞系相关产品:ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞 H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞 JEKO细胞系相关产品:H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞 JEKO细胞系相关产品:H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞 BJA-B-1细胞系相关产品:GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞 H1666细胞系相关产品:Hs 888.Lu细胞、H-2122细胞、LA795细胞 NRK49F细胞系相关产品:SN4741细胞、GM04678细胞、3T3-L1 ad细胞 HSC4细胞系相关产品:H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞 MV-522细胞系相关产品:SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞 143TK-细胞系相关产品:BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞 LM(TK-)细胞系相关产品:HCC0015细胞、373 MG细胞、B/C3T3细胞 SU86.86细胞系相关产品:NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞 NCIH2122细胞系相关产品:LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞 Hut292细胞系相关产品:H650细胞、GM3569细胞、H-841细胞 B16-BL6细胞系相关产品:C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞 M-1细胞系相关产品:HEEpiC细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、RPMI7951细胞 IBRS-2细胞系相关产品:Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞 A101D细胞系相关产品:SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞 G422细胞系相关产品:SKGT2细胞、B16F1细胞、H-2170细胞 HCC1500细胞系相关产品:OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞 HR-1细胞系相关产品:HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞 hTERT RPE1细胞系相关产品:RPMI-8226细胞、MHCC97-H细胞、H-2108细胞 SW1463细胞系相关产品:H69细胞、SF539细胞、TE1细胞 H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞 PTK 2细胞系相关产品:COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞 MC 116细胞系相关产品:GM06141细胞、KFB细胞、MH-S细胞 NCI-460细胞系相关产品:CAL12T细胞、GFP-Olig2细胞、MKN-7细胞 D283 Med细胞系相关产品:253JB-V细胞、L 428细胞、BC3H1细胞 Hs-606-T细胞系相关产品:SKES1细胞、NCIH1838细胞、LP-1细胞 Epithelioma Papulosum Cyprini细胞系相关产品:EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞 ChaGo-K-1细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞 NCI.H23细胞系相关产品:KYSE450细胞、751细胞、AG06814-J细胞 SCL-I细胞系相关产品:WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞 COLO 320细胞系相关产品:THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞 MDA157细胞系相关产品:Mink Lung细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、UCLA NPA-87-1细胞 MDA157细胞系相关产品:Mink Lung细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、UCLA NPA-87-1细胞 Colo-206F细胞系相关产品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、V-79细胞、NCI-H1930细胞 HEK-293A细胞系相关产品:ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞 CHO-K1细胞系相关产品:V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞 PL12细胞系相关产品:16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞 BHK 21细胞系相关产品:NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞 NP-69细胞系相关产品:H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞 Jurkat Clone E6-1细胞系相关产品:CNE2Z细胞、D-324MED细胞、RIN-m细胞 H.Ep. #2细胞系相关产品:H1792细胞、Hs 739.T细胞、COV-362细胞 NCC-IT细胞系相关产品:NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞 BV173细胞系相关产品:RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞 HSC-3细胞系相关产品:NCIH2081细胞、Nb2细胞、HUCEC细胞 MSF细胞系相关产品:H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞 RWPE-1 epithelioid cells人正常前列腺上皮细胞系 HUT 125细胞系相关产品:LTEP a2细胞、TPC1细胞、SW260细胞 NK92MI细胞系相关产品:KYSE 450细胞、HSCT6细胞、Clone 15 HL-60细胞 HEK/293细胞系相关产品:VMM5A细胞、HSAS4细胞、H1688细胞 Ly19细胞系相关产品:CRFK细胞、RCC23细胞、VP 229细胞 "
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