TM3 epithelioid cells小鼠睾丸间质细胞系

"TM3 epithelioid cells小鼠睾丸间质细胞系
细胞背景资料：TM３细胞在LH作用下cAMP产量升高，但对促卵泡激素没有响应。对LH的响应持续时间与血清批次有关。在LH存在下，细胞可以代谢胆固醇。检测发现鼠痘病毒阴性。
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
293T/17细胞系相关产品：SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞
SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
HBL1细胞系相关产品：U2-OS细胞、VSMC细胞、D324细胞
细胞生长：贴壁
TM3 epithelioid cells小鼠睾丸间质细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
细胞传代方法：１：２传代
MNNGHOS细胞系相关产品：BIC1细胞、V 79细胞、H28细胞
H35 Reuber细胞系相关产品：CV-1 in Origin Simian-1细胞、RN细胞、MMAc-SF细胞
DHL-16细胞系相关产品：MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞
IPECJ2细胞系相关产品：EOC-20细胞、CAL-12T细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TM3 epithelioid cells小鼠睾丸间质细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：上皮样
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
N-2a细胞系相关产品：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
Ha Fe细胞系相关产品：HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
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SUM 52PE细胞系相关产品：OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
MRC-V细胞系相关产品：Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
D10.G4.1细胞系相关产品：CHP-126细胞、QGY-7703细胞、MDA-MB157细胞
CAL 33细胞系相关产品：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
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TM3 epithelioid cells小鼠睾丸间质细胞系
SW-1271细胞系相关产品：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
NCI-H1876细胞系相关产品：H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
SNU-761细胞系相关产品：HM1900细胞、MES 13细胞、769P细胞
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RCS细胞系相关产品：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞
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TE-10细胞系相关产品：NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞
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SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
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NCI-H2227细胞系相关产品：H-2286细胞、HC11细胞、FAT细胞
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BT-20细胞系相关产品：Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞
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COS7细胞系相关产品：BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
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TM3 epithelioid cells小鼠睾丸间质细胞系
DU_145细胞系相关产品：ETCC-007细胞、FT-293细胞、RCC 7860细胞
H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、SW-1417细胞、HNE2细胞
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MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、OVCAR-433细胞、IHH4细胞
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