LK-2 epithelioid cells人肺癌细胞系

"LK-2 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
NCI/ADRRES细胞系相关产品：118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞
TW01细胞系相关产品：WEHI3B细胞、CCD966SK细胞、SKRC-39细胞
KYSE-50细胞系相关产品：Hs604T细胞、Calu 3细胞、SW 620细胞
细胞生长：贴壁
LK-2 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RCK8细胞系相关产品：HCC-1954BL细胞、NCI H929细胞、C3H 10T1/2细胞
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞
HCT_116细胞系相关产品：RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
H8细胞系相关产品：SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
UM-RC-2细胞系相关产品：PNEC30细胞、B95.8细胞、Hs832T细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LK-2 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
YES 2细胞系相关产品：SNU520细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SUM-159细胞
WM451Lu细胞系相关产品：HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞
FUOV1细胞系相关产品：COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞
GM04671细胞系相关产品：HONE-1细胞、Karpas-299细胞、H735细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品：SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
SK-N-BE(1)n细胞系相关产品：NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
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MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
32D/cl3细胞系相关产品：H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞
SW780细胞系相关产品：TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
LK-2 epithelioid cells人肺癌细胞系
CAL-85-1细胞系相关产品：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞
MDA 435细胞系相关产品：SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞
SKLMS1细胞系相关产品：SCLC-21H细胞、PLA 802细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞
P3/NSI/1-AG4-1细胞系相关产品：SW 1088细胞、Alexander细胞、CAL-148细胞
CoC1细胞系相关产品：D324细胞、L540细胞、74Int细胞
FAO-1细胞系相关产品：LS 174 T细胞、CORL23细胞、NCI-H2330细胞
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H-2330细胞系相关产品：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
HHFK细胞系相关产品：HEMCSS细胞、MDA-MB-134细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞
TN5B14细胞系相关产品：MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞
NK-92 MI细胞系相关产品：H2291细胞、GP293细胞、BE(2)M17细胞
Keio University-19-19细胞系相关产品：SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
T-ALL 1细胞系相关产品：ZR75-30细胞、NUGC-3细胞、OCI-Ly 19细胞
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
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NCIH441细胞系相关产品：ASH-3细胞、HA细胞、A-204细胞
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COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
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FUOV1细胞系相关产品：COLO320 DM细胞、SW 948细胞、MDAMB330细胞
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