"FL83B epithelioid cells小鼠正常肝细胞系 细胞背景资料:肝;自发永生;C57BL/6J 细胞形态:上皮细胞样 贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞! L-Wnt3A细胞系相关产品:Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞 H2196细胞系相关产品:LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞 HEC1-B细胞系相关产品:HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞 细胞生长:贴壁 FL83B epithelioid cells小鼠正常肝细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 P30/OHK细胞系相关产品:WSU-HN13细胞、LCD细胞、PAEC细胞 HCT/FU细胞系相关产品:Hs 27细胞、Panc-1-P细胞、HUVSMC细胞 U20S细胞系相关产品:GP-293细胞、HNE-1细胞、GA-10(Clone 4)细胞 FM88细胞系相关产品:BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞 NCI-H2291细胞系相关产品:NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 FL83B epithelioid cells小鼠正常肝细胞系 细胞生长特性:贴壁 细胞形态特性:详见细胞说明书 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。 VM-CUB1细胞系相关产品:HSC4细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞、SW-948细胞 LL/2细胞系相关产品:MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞 HCC-95细胞系相关产品:Kit-225细胞、HDQ-P1细胞、DMS-273细胞 OCI-LY-1细胞系相关产品:Hs 445细胞、L6细胞、SMMC7721细胞 HCC 38细胞系相关产品:NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞 OV433细胞系相关产品:HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞 CHO Lec1细胞系相关产品:Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞 Jurkat E6.1细胞系相关产品:H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞 OVCAR 8细胞系相关产品:CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞 Kato-III细胞系相关产品:Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞 FL83B epithelioid cells小鼠正常肝细胞系 NS-20Y细胞系相关产品:CCRF CEM细胞、VK2细胞、U2932细胞 MKN 45细胞系相关产品:hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞 H-220细胞系相关产品:Cor L51细胞、SV-HUC-1细胞、PK 15细胞 VP303细胞系相关产品:Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞 JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞 NCI-SNU-601细胞系相关产品:U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞 NCI-SNU-601细胞系相关产品:U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞 NCI-H64细胞系相关产品:HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞 Emory University-3细胞系相关产品:NCI747细胞、CHP100细胞、Capan-2细胞 WM-239A细胞系相关产品:KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞 BCaP 37细胞系相关产品:LA-N-1细胞、PC615.3细胞、AG06814-N细胞 95-D细胞系相关产品:Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞 H-2342细胞系相关产品:HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞 IOSE-Van细胞系相关产品:VM Cub 1细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞、HMO6细胞 NCI-H2073细胞系相关产品:Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞 SK-Mel 1细胞系相关产品:Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞 EU-2细胞系相关产品:TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞 SCaBER细胞系相关产品:QGY7703细胞、RGC6细胞、L 428细胞 Pt K2 (NBL-5)细胞系相关产品:NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞 RL95细胞系相关产品:MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞 HBdSMC细胞系相关产品:SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞 CEM C7细胞系相关产品:NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞 IR 983F细胞系相关产品:MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞 PTK 1细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-9细胞、SKRC-42细胞、SHI-1细胞 P31-FUJ细胞系相关产品:801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞 RL-65细胞系相关产品:U266S细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞、MDA468细胞 EFM192B细胞系相关产品:COLO-394细胞、NCI-H2227细胞、Helacyton gartleri细胞 HEK-AD 293细胞系相关产品:H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞 NCI-H810细胞系相关产品:ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞 P3J-HR-1细胞系相关产品:HFF1细胞、HIEC6细胞、MCF7-GFP细胞 HuH7细胞系相关产品:CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞 MV522细胞系相关产品:PANC-28细胞、MCF-10A细胞、JROECL 33细胞 UCLA SO M21细胞系相关产品:MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞 BIU-87细胞系相关产品:HUT 28细胞、COLO320DM细胞、MDA-MB-468-RED细胞 QBI-293A细胞系相关产品:G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞 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