"NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:淋巴母细胞样 贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉! CESS细胞系相关产品:EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞 HuT-102细胞系相关产品:102PT细胞、SK-UT-1细胞、P3-X63Ag8细胞 VSC4.1细胞系相关产品:UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞 细胞生长:悬浮 NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。 细胞传代方法:1:3传代 DoTc2-4510细胞系相关产品:MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞 HONE1细胞系相关产品:T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞 OCI/AML-5细胞系相关产品:EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞 Tu 177细胞系相关产品:KP-4细胞、NCI-SNU-1细胞、H-82细胞 SACCLM细胞系相关产品:HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞样 细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。 RIN Cl-5F细胞系相关产品:SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞 EC-GI细胞系相关产品:MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞 CEM C7细胞系相关产品:NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞 NSC-34细胞系相关产品:CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞 A498细胞系相关产品:H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞 NIH:OVCAR4细胞系相关产品:Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞 SK-N-SH细胞系相关产品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞 HIBEC细胞系相关产品:NCI-BL1339细胞、DOK细胞、NG-108-15细胞 F442A细胞系相关产品:TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞 MC-CAR细胞系相关产品:NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞 NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系 NCI-H2172细胞系相关产品:Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞 HeLa S-3细胞系相关产品:HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞 SNU-423细胞系相关产品:CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞 COLO-680N细胞系相关产品:HEK-293FT细胞、KP 4细胞、HGSMC细胞 MiaPaCa-2细胞系相关产品:TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞 CaES-17细胞系相关产品:MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞 CaES-17细胞系相关产品:MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞 CCD19Lu细胞系相关产品:Kasumi-1细胞、McA-RH7777细胞、Kit-225细胞 TE353.SK细胞系相关产品:Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞 CWR22R细胞系相关产品:EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞 HFL1细胞系相关产品:MC3T3细胞、COLO-684细胞、SKO-007细胞 H-774细胞系相关产品:GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞 NCIH2107细胞系相关产品:H295R细胞、CD-18细胞、Hs 822.T细胞 HUASMC细胞系相关产品:HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞 hFOB细胞系相关产品:H.Ep. No. 2细胞、NCI-446细胞、COV 504细胞 EJ-1细胞系相关产品:Functional Liver Cell-7细胞、FHCRC subclone 11细胞、Cor L88细胞 Pt K1细胞系相关产品:Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞 RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞 WM451Lu细胞系相关产品:HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞 P30-OHKUBO细胞系相关产品:BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞 HT(H9)细胞系相关产品:Jurkat E6-1细胞、PLA-801C细胞、CG-4细胞 NCIH2126细胞系相关产品:GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞 H-522细胞系相关产品:HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞 GDM1细胞系相关产品:Jurkat-FHCRC细胞、WPMY-1细胞、MKN-1细胞 TO175T细胞系相关产品:CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞 A549/ATCC细胞系相关产品:DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞 EFM-19细胞系相关产品:SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞 Swiss 3T6细胞系相关产品:GM02219D细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞、KM-12细胞 BetaTC6细胞系相关产品:NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞 PANC-10-05细胞系相关产品:SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞 RPMI7951细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞 MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞 Hs739T细胞系相关产品:OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞 SK-N-BE细胞系相关产品:ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞 Hs940-T细胞系相关产品:NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞 Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品:GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞 TE8细胞系相关产品:RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞 NCI-H358细胞系相关产品:OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞 BeWo细胞系相关产品:SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞 ME16C细胞系相关产品:NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞 NCI-HUT-125细胞系相关产品:Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞 BE(2)-M17细胞系相关产品:H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞 LA 4细胞系相关产品:T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞 OCI-AML5细胞系相关产品:JURKAT E-6.1细胞、HCe-8693细胞、GM07404A细胞 LTEP a2细胞系相关产品:P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞 LNCaP细胞系相关产品:Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞 COLO-741细胞系相关产品:HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞 NCI-Hut 125细胞系相关产品:R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞 rRTEC细胞系相关产品:H596细胞、NCI-H1105细胞、MCF7ADR细胞 HDQ-P1细胞系相关产品:HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞 MDA-MB-468-RED细胞系相关产品:GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞 NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系 HEK 293 c18细胞系相关产品:HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞 HS-294细胞系相关产品:KPL-4细胞、NCI-H2009细胞、Porcine Kidney-15细胞 BL1339细胞系相关产品:L363细胞、PATU-S细胞、UM-RC-2细胞 CEM C7细胞系相关产品:NPC-TW 039细胞、MDCKII-WT细胞、COLO-679细胞 "
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