"WM266-4 Adherent人黑素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太高）直接接入，移液器不需完全打到，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
WM266-4 Adherent人黑素瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
有关实验室细胞培养基知识普及：经典的培养基有很多种，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是应用最广泛的培养基。其他如M１９９、IMDM、L１５培养基等也用于某些细胞的培养；MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度；BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的４倍，采用双倍的HCO３-和CO２浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为１０００mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为４５００mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞；Ham’s F１２是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F１２还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养；RPMI １６４０培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
PGBE1细胞系相关产品：Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
CHG-5细胞系相关产品：SW1573细胞、A375.S2细胞、CL 1-5细胞
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ARO81-1细胞系相关产品：IBRS2细胞、Bowes melanoma cells细胞、CoCL2细胞
NCIH2227细胞系相关产品：OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
H322T细胞系相关产品：H676B细胞、MV-522细胞、U138MG细胞
细胞生长特性：贴壁生长
WM266-4 Adherent人黑素瘤细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
32Dc3细胞系相关产品：L-M(TK-)细胞、BMSCs（mBMSCs）细胞、BE(2)M-17细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
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WM266-4 Adherent人黑素瘤细胞系
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H-28细胞系相关产品：NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞
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Hs606细胞系相关产品：JHH7细胞、NCI-SNU-620细胞、Sf21细胞
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