"COLO 741 Thawing人直肠癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
COLO 741 Thawing人直肠癌细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO 741 Thawing人直肠癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
我常看到一个比较复杂的四步消化法,这个挺有意思,我也是次听说,应该是网友自己发展出来的方法,很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面,还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞,不需要胰酶孵育即可,只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好,这个视细胞而定。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好;比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),就以colon cancer为例,比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态特性:详见细胞说明书
ND7/23细胞系相关产品:BA/F3细胞、LN229细胞、P3X63 Ag8细胞
MUS-M1细胞系相关产品:KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞
624细胞系相关产品:MCMEC细胞、D10.G4.1细胞、CMT 64细胞
Reuber H-35细胞系相关产品:STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞
Murine Lung Epithelial-12细胞系相关产品:OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞
Panc 4.03细胞系相关产品:WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞
SMMC7721细胞系相关产品:CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
CFPAC-1细胞系相关产品:TMK1细胞、ACT-1细胞、JeKo-1细胞
Tn5B1-4细胞系相关产品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞
F98细胞系相关产品:MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞
AMC-HN-8细胞系相关产品:BEL7405细胞、HMSC细胞、SKMES-1细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品:WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
UO31细胞系相关产品:MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞
SW 1417细胞系相关产品:OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
TE12细胞系相关产品:UMNSAH/DF#1细胞、SNU-5细胞、HCT FET细胞
HCC1937细胞系相关产品:JROECL 21细胞、RPMI-1846细胞、H-1819细胞
HT55细胞系相关产品:SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
MCF7/WT细胞系相关产品:MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞
HFT8810细胞系相关产品:MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞
CF Pac1细胞系相关产品:bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
KAT-5细胞系相关产品:NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞
Rat 1细胞系相关产品:HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
TE14细胞系相关产品:C3H/10T1/2 clone 8细胞、OVCAR10细胞、7404细胞
B16-F10-BL6细胞系相关产品:OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞
TMD8细胞系相关产品:UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
SKNEP细胞系相关产品:U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞
COLO 741 Thawing人直肠癌细胞系
Mink细胞系相关产品:ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
MSB1细胞系相关产品:LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
D283MED细胞系相关产品:Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
JB6Cl30细胞系相关产品:MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
VP 229细胞系相关产品:COLO-680N细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞、UM-UC3细胞
H676B细胞系相关产品:CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞
B16 BL6细胞系相关产品:KOSC2细胞、HeLa/S3细胞、Jurkat-77细胞
NCI-H1703细胞系相关产品:LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞
MRC-5细胞系相关产品:Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞
HSMC细胞系相关产品:NCI-HUT-596细胞、Kasumi-1细胞、NCI-SNU-C2A细胞
NCIH810细胞系相关产品:NCI-H2126细胞、NFHIOSE-29细胞、LS513细胞
P-19细胞系相关产品:HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞
COLO684细胞系相关产品:GP5d细胞、MDA134细胞、SNUC1细胞
Panc8.13细胞系相关产品:GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
My-La 2059细胞系相关产品:U-266 AR1细胞、H345细胞、MIMVEC细胞
hUC-MSC细胞系相关产品:NCIH378细胞、CHO-ori细胞、MXI细胞
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SW962细胞系相关产品:A375.S2细胞、HTR-8/SVneo细胞、3T6-Swiss albino细胞
hEEC细胞系相关产品:Pa017C细胞、A-2780细胞、MM.1S细胞
SCC VII细胞系相关产品:AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
COLO 205细胞系相关产品:H4-II-E细胞、SUM 102PT细胞、COLO_320DM细胞
Hs 604.T细胞系相关产品:H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞
LS-174T细胞系相关产品:H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
NCIH446细胞系相关产品:Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞
OV2008细胞系相关产品:NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞
Sp2/0细胞系相关产品:H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞
Panc4.03细胞系相关产品:RMG-1细胞、EB2细胞、Melanoma 14细胞
SVHUC细胞系相关产品:H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞
PTK-2细胞系相关产品:MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞
MCA-205细胞系相关产品:HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞
C-33-A细胞系相关产品:PVEC细胞、293c18细胞、NCI-H2107细胞
BEL/FU细胞系相关产品:KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
DR2R 1610细胞系相关产品:GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
COLO 741 Thawing人直肠癌细胞系
RAW264细胞系相关产品:TYK-nu细胞、CD18细胞、HIEC6细胞
RERF-LC-MS细胞系相关产品:NH6细胞、H-211细胞、RBL-I细胞
Nthy-ori 3.1细胞系相关产品:CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
SUD4细胞系相关产品:HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞
V79-4细胞系相关产品:LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
HSC 3细胞系相关产品:P1-Raji细胞、YES2细胞、SNU368细胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞系相关产品:NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
S37细胞系相关产品:HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞
GM02132C细胞系相关产品:HR-8348细胞、GLC82细胞、MC57G细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品:C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
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