"CHL-1 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
CHL-1 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:6—1:10传代
细胞培养更好经验详解:1)收到细胞,首先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察,细胞初步没有问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,次处理也可以依照第二种情况。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CHL-1 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞冻存知识普及:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
细胞形态特性:上皮细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品:MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
OVCAR3细胞系相关产品:BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
KCL-22细胞系相关产品:Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
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OV 1063细胞系相关产品:Pt K2 (NBL-5)细胞、B6Tert-1细胞、RL细胞
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HRMC细胞系相关产品:Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞
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CTV1细胞系相关产品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、NEC细胞、PANC.1细胞
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CHL-1 Thawing人黑色素瘤细胞系
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RPMI-7666细胞系相关产品:T HEECs细胞、NTERA-2/D1细胞、Hs281T细胞
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HuTu-80细胞系相关产品:Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
NCI-H2170细胞系相关产品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
CHL-1 Thawing人黑色素瘤细胞系
ST细胞系相关产品:HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞
MOLT3细胞系相关产品:NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
NCIH1694细胞系相关产品:GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
HSKMC细胞系相关产品:C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞
PaTu-8988s细胞系相关产品:8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
NCI-SNU-1细胞系相关产品:HCC-78细胞、MGSMC细胞、MH7A细胞
HK2细胞系相关产品:OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞
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BTI-TN5B1-4细胞系相关产品:HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
Walker256-TC细胞系相关产品:WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
GOS-3细胞系相关产品:SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞
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