"A-9 Thawing小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞背景资料：皮下结缔组织；自发永生；雄性；C３H/An
细胞形态：上皮细胞样
A-9 Thawing小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A-9 Thawing小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明：成纤维细胞：来自胎儿传代５０次后衰老死亡，来自成人传代２０次后衰老死亡(与具体年龄有关；来自小鼠传代１４--２８次后衰老死亡，来自乌龟传代９０--１２５次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化，包括：蛋白质合成速度降低，已有蛋白质结构变化，特异蛋白质成份出现;同时，细胞核，线粒体，膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因，尚无定论，出现过好几种理论与假说，其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象，常见的细胞死亡形式有３种：坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中，因为环境因素的突然变化或病原物的入侵，导致一部分细胞死去，称为细胞的病理死亡，或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡；细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件，不依赖于其它两种细胞死亡机理，如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况，一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分；似乎带有“牺牲局部，保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡，明显地受遗传控制，称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡，是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程，无论从形态学、生物学还是生化的特征来说，都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用，在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象，凋亡失控的结果将是可怕的：凋亡不足时，易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病，如老年性痴呆症(Alzheimer""s disease)、帕金森氏症(Parkinson""s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Mink细胞系相关产品：ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
HCT8细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞
NCI-H520细胞系相关产品：Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
BCPAP细胞系相关产品：NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞
DLD-1细胞系相关产品：HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品：M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
ACC-2细胞系相关产品：NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
HDMEC细胞系相关产品：Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞
SUPB15细胞系相关产品：SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞
P 3 HR 1细胞系相关产品：SK-MEL-31细胞、Monomac-1细胞、NCI-HUT-460细胞
PLA 802细胞系相关产品：MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
YES2细胞系相关产品：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞
T98-G细胞系相关产品：H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞
Human Kidney-2细胞系相关产品：NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞
HEK-293F细胞系相关产品：Jurkat E6细胞、MDA-435细胞、Hs 940.T细胞
HEP-3B2细胞系相关产品：CNE-2Z细胞、MV-3细胞、HCS2/8细胞
OVCAR-432细胞系相关产品：SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞
JVM-3细胞系相关产品：KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
CORL88细胞系相关产品：H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞
EJ1细胞系相关产品：SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞
NIH3T3细胞系相关产品：MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
SU.86细胞系相关产品：TCam-2细胞、IGROV1细胞、HPAF-I细胞
A9细胞系相关产品：NCIH1688细胞、H-1573细胞、A-10细胞
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞
CHO Lec1细胞系相关产品：Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞
BJ1细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
A-9 Thawing小鼠皮下结缔组织细胞系
HSC1细胞系相关产品：PC 61 5.3细胞、HLMVEC细胞、HT1376细胞
Eph4 1424细胞系相关产品：HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
Y79细胞系相关产品：CHL-1细胞、MAVER细胞、NCI-H211细胞
hFOB1.19细胞系相关产品：Helacyton gartleri细胞、IPLB-SF 21细胞、Ramos细胞
CII细胞系相关产品：MLFC细胞、bEnd3细胞、HEL92.1.7细胞
COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
NCI-HUT-596细胞系相关产品：675T细胞、A 253细胞、CWR22Rv1细胞
ARO-81细胞系相关产品：CT-26细胞、RCC4细胞、SK-N-BE(1)细胞
639-V细胞系相关产品：PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞
SLMT1细胞系相关产品：L 428细胞、SK-N-F1细胞、HEC-1-B细胞
NCI-H1781细胞系相关产品：253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
ARPE-19细胞系相关产品：CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
SUPM2细胞系相关产品：GM05887A细胞、JAR细胞、Tu177细胞
COLO320DM细胞系相关产品：GC-1spg细胞、HFF细胞、HEL 92.1.7细胞
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
L929细胞系相关产品：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
Pt K2细胞系相关产品：Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞
BMDC细胞系相关产品：KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
HCT15细胞系相关产品：P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞
Capan1细胞系相关产品：SK-RC-20细胞、UWB1-289细胞、HRMC细胞
SRA01/04细胞系相关产品：SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞
NEC-8细胞系相关产品：TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞
Hs 888Lu细胞系相关产品：Ramos 2G6 4C10细胞、KP2细胞、KYSE70细胞
C3H-10T1/2细胞系相关产品：MUTZ-3细胞、ATN1细胞、Hs 281.T细胞
SW 900细胞系相关产品：H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
HO-8910PM细胞系相关产品：3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞
H1703细胞系相关产品：DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞
H-1836细胞系相关产品：Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞
U-937细胞系相关产品：MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞
MLO-Y4细胞系相关产品：HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
A-9 Thawing小鼠皮下结缔组织细胞系
MDA-468细胞系相关产品：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞
Scott and White No. 13细胞系相关产品：NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞
TE-4细胞系相关产品：GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
CFPAC-1细胞系相关产品：TMK1细胞、ACT-1细胞、JeKo-1细胞
RBL-1细胞系相关产品：RBVEC细胞、Hs 604.T细胞、GM00215细胞
NCTC1469细胞系相关产品：SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞
MARC 145细胞系相关产品：CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞
GM3190细胞系相关产品：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞
SW620细胞系相关产品：Granta 519细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、Vero-76细胞
451Lu细胞系相关产品：NS1-1 Ag4.1细胞、RPMI No. 1846细胞、HCa/16A3-F细胞
NCI-H196细胞系相关产品：NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞
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