"RF/6A Thawing猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
细胞背景资料：脉络膜-视网膜；内皮细胞；自发永生
细胞形态：上皮细胞样
RF/6A Thawing猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
细胞生长：贴壁
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°C高压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RF/6A Thawing猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
细胞生长特性：贴壁
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI H69细胞系相关产品：SU.86.86细胞、CAL51细胞、SNU-387细胞
Sp2/mIL-6细胞系相关产品：MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
PC-3M 2B4细胞系相关产品：KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
H929细胞系相关产品：639 V细胞、VK-2/E6E7细胞、NOK细胞
HCC-94细胞系相关产品：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞
U-hth74细胞系相关产品：MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
A-431细胞系相关产品：RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞
TE6细胞系相关产品：MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞
IM-9细胞系相关产品：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
SV40 MES 13细胞系相关产品：DITNC1细胞、OCI-Ly 10细胞、HCC-95细胞
RA-FLSs细胞系相关产品：HCC0044细胞、ZR75-30细胞、L6细胞
JeKo-1细胞系相关产品：UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞
COLO 16细胞系相关产品：EFM192C细胞、A427细胞、CAL 12T细胞
H2023细胞系相关产品：SUPT-1细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞、Hs822T细胞
RPMI 7951细胞系相关产品：X63.Ag8.653细胞、BEAS 2B细胞、SU-DHL-4细胞
HSF2细胞系相关产品：ssMCF-7细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、NCI-H2196细胞
NCI-H920细胞系相关产品：HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞
HEK 293T/17细胞系相关产品：SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
HuH-1细胞系相关产品：NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
HuH-1细胞系相关产品：NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
RAMOS2G64C10细胞系相关产品：McCoy细胞、MADB106细胞、U-87MG细胞
MUTZ-1细胞系相关产品：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
H-87细胞系相关产品：Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
NCIH810细胞系相关产品：NCI-H2126细胞、NFHIOSE-29细胞、LS513细胞
RF/6A Thawing猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
HARA-B细胞系相关产品：HUCCT1细胞、MARC145细胞、DR2R1610细胞
MDA.MB.435细胞系相关产品：B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞
PC.3细胞系相关产品：SK-NM-C细胞、AZ 521细胞、SK-NM-C细胞
BEAS 2B细胞系相关产品：NTERA-2细胞、MM1.S细胞、NCI-HUT-125细胞
CAL-62细胞系相关产品：mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞
HTR8svn细胞系相关产品：HCC-9204细胞、Panc3_27细胞、HT-144细胞
NRK细胞系相关产品：DC2.4细胞、Sp2/O-Ag14细胞、NCTC-3960细胞
CT26细胞系相关产品：H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞
SUPB-15细胞系相关产品：CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
SKML-28细胞系相关产品：CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品：SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
Oregon J-111细胞系相关产品：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞
COLO 680N细胞系相关产品：SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞
3T3细胞系相关产品：Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
Centre Antoine Lacassagne-12T细胞系相关产品：MDA MB 134VI细胞、HOS细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞
NCIH1963细胞系相关产品：C1498细胞、NR-8383细胞、ES2细胞
PATU-S细胞系相关产品：SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞
H-810细胞系相关产品：SKRC-42细胞、COLO-320DM细胞、H 9细胞
WM 239A细胞系相关产品：WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
KNS62细胞系相关产品：LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
SF-767细胞系相关产品：SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞
Pa17C细胞系相关产品：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞
NU-GC-2细胞系相关产品：NCI-460细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞系相关产品：SNU-869细胞、SK-Col-1细胞、D341细胞
Hs 606细胞系相关产品：L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞
QBI-293A细胞系相关产品：G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞
S180细胞系相关产品：SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞
MDA-kb2细胞系相关产品：COLO-699细胞、ketr 3细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞
Hs-274-T细胞系相关产品：GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞
KE 37细胞系相关产品：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
RF/6A Thawing猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
BE2-M17细胞系相关产品：COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品：SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
MDA 435细胞系相关产品：SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞
A-375.S2细胞系相关产品：LN-229细胞、H35细胞、HCT 15细胞
58F细胞系相关产品：BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞
JURKAT E-6.1细胞系相关产品：MEL细胞、NCIH647细胞、Balb/c3T3细胞
SUM-159细胞系相关产品：NCI-H1341细胞、HS5细胞、JurkatE6-1细胞
LSC-1细胞系相关产品：NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
MV411细胞系相关产品：SCC7细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、PFSK细胞
HEK-293H细胞系相关产品：SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
Hs 729.T细胞系相关产品：H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞
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