"FRhK-4 Thawing恒河猴胚肾细胞系
细胞背景资料：胚胎；肾；自发永生；雌性
细胞形态：上皮细胞样
FRhK-4 Thawing恒河猴胚肾细胞系
细胞生长：贴壁
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
FRhK-4 Thawing恒河猴胚肾细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
HCC2218细胞系相关产品：Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞
NCI-H889细胞系相关产品：P3 88 D1细胞、MCF.10A细胞、BCAP37细胞
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
Hs840T细胞系相关产品：BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品：MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
Anip973细胞系相关产品：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
TE15细胞系相关产品：N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
LC-1Sq细胞系相关产品：NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞
NCI-H2107细胞系相关产品：MCF-7/ADR-RES细胞、COLO206F细胞、K422细胞
D407细胞系相关产品：NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
SNU423细胞系相关产品：OCILY-10细胞、GOTO细胞、EFM192A细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞系相关产品：HFB细胞、PL-5细胞、MCF 7B细胞
PANC 327细胞系相关产品：HepG2/C3A细胞、LS174细胞、RCC-4细胞
NCI-H2066细胞系相关产品：Panc_08_13细胞、EFM192C细胞、TGBC-11-TKB细胞
IMCD-3细胞系相关产品：NCI-H2009细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞、LIM 1215细胞
IPAM-WT细胞系相关产品：Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞
LMH细胞系相关产品：SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞
MPC-11细胞系相关产品：U2OS细胞、SJSA细胞、HIT.T15细胞
CAL 85-1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
CAL 85-1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
NCI-H102细胞系相关产品：KHYG1细胞、B/C3T3细胞、WIL2 S细胞
PSN-1细胞系相关产品：BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞
MKN 45细胞系相关产品：hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞
NCI-H2342细胞系相关产品：174xCEM.T2细胞、NCIH889细胞、hEEC细胞
FRhK-4 Thawing恒河猴胚肾细胞系
WRL-68细胞系相关产品：LS411细胞、MeT-5A细胞、SUDHL-5细胞
OC-3-VGH细胞系相关产品：SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
T47-D细胞系相关产品：L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞
H-226细胞系相关产品：RSC96细胞、CAL 62细胞、NCI-H28细胞
CAL 39细胞系相关产品：MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
TF-1a细胞系相关产品：Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞
KYSE 450细胞系相关产品：Med 283细胞、WM239细胞、SNU354细胞
NCIH1694细胞系相关产品：GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
IR983F细胞系相关产品：NK-92细胞、32D clone 3细胞、EL-4细胞
32Dc3细胞系相关产品：L-M(TK-)细胞、BMSCs（mBMSCs）细胞、BE(2)M-17细胞
Duck embryo细胞系相关产品：ECC12细胞、SCLC21H细胞、Sp 2817细胞
HET-1A细胞系相关产品：GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
ND7/23细胞系相关产品：BA/F3细胞、LN229细胞、P3X63 Ag8细胞
Hs839T细胞系相关产品：U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
H19-7细胞系相关产品：GM07404细胞、OCI AML2细胞、SCL-II细胞
B16BL6细胞系相关产品：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
NCIH1793细胞系相关产品：D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞
NCI-H2591细胞系相关产品：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞
KAT-5细胞系相关产品：NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞
MV4II细胞系相关产品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞
TE7细胞系相关产品：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
NS-1-Ag4-1细胞系相关产品：H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
SK-MES细胞系相关产品：624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞
VMRCRCZ细胞系相关产品：BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞
P-19细胞系相关产品：HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞
MDA231细胞系相关产品：JURKAT E-61细胞、Panc813细胞、KU-812细胞
OV 1063细胞系相关产品：Pt K2 (NBL-5)细胞、B6Tert-1细胞、RL细胞
HCC0202细胞系相关产品：B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞
NCI-H1869细胞系相关产品：LS-1034细胞、ssMCF7细胞、TGHAVSMC细胞
ROS17/28细胞系相关产品：Immortalized Human Hepatocytes细胞、MC57G细胞、IGROV-1细胞
AR4IP细胞系相关产品：D341 Med细胞、IEC 6细胞、SUDHL-16细胞
PLB-985细胞系相关产品：NCI-H676细胞、CAL 12细胞、KMH2细胞
FRhK-4 Thawing恒河猴胚肾细胞系
NCI-H1666细胞系相关产品：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞
HELA-GFP细胞系相关产品：251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
A498细胞系相关产品：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞
Hs343T细胞系相关产品：Colon 26细胞、HPDLF细胞、FAO-1细胞
NCI-H524细胞系相关产品：DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
Co 115细胞系相关产品：COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞
PASMCS细胞系相关产品：138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞
D-324MED细胞系相关产品：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
3D4/21细胞系相关产品：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞
A-427细胞系相关产品：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
SKMES细胞系相关产品：THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞
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