"LLC-MK2 Thawing恒河猴肾细胞系
细胞背景资料：胚胎；肾；自发永生
细胞形态：上皮细胞样
LLC-MK2 Thawing恒河猴肾细胞系
细胞生长：贴壁
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LLC-MK2 Thawing恒河猴肾细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞
HTori:3细胞系相关产品：KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞
Anip973细胞系相关产品：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞
T1-73细胞系相关产品：PM6细胞、C12细胞、CL MC/9细胞
PC-3M-1E8细胞系相关产品：OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞
KM12SM细胞系相关产品：OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞
HFLS-OA细胞系相关产品：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
HCEC细胞系相关产品：HARAB细胞、VSC4.1细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞
UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
Jiyoye细胞系相关产品：ABC-1细胞、LNCaP C4-2细胞、3AO细胞
Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
OCI-AML3细胞系相关产品：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
H1299细胞系相关产品：C-4-I细胞、Jurkat细胞、T8细胞
HS578细胞系相关产品：CAMA-1细胞、Wien-133细胞、SMA 560细胞
SKBR-3细胞系相关产品：RPMI 1846细胞、Jurkat clone A3细胞、MDA-MB-468细胞
H-929细胞系相关产品：C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
DHL-16细胞系相关产品：MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
S16细胞系相关产品：MS751细胞、Hep 3B2细胞、BEL-7404细胞
2780细胞系相关产品：aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞
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hFOB1.19细胞系相关产品：Helacyton gartleri细胞、IPLB-SF 21细胞、Ramos细胞
Sp2/mIL-6细胞系相关产品：MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
B35细胞系相关产品：HT-3细胞、NCI-H1688细胞、MeT-5A细胞
HKF细胞系相关产品：H-157细胞、OV1063细胞、NCIH520细胞
LLC-MK2 Thawing恒河猴肾细胞系
QG-56细胞系相关产品：SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
PZ-HPV-7细胞系相关产品：NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品：SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品：CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
H1155细胞系相关产品：HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞
NCIH1688细胞系相关产品：NCI-H23细胞、AGS细胞、786-0WT细胞
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
MPP-89细胞系相关产品：Adeno-293细胞、COLO 738细胞、IBRS2细胞
RPE-1细胞系相关产品：Human Hepatocyte Line 5细胞、H-1793细胞、HFLS细胞
A.704细胞系相关产品：HEK293-EBNA细胞、16HBE140细胞、HSC-2细胞
HN 4细胞系相关产品：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞
KFB细胞系相关产品：YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
CAL-27细胞系相关产品：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞
HT 1197.T细胞系相关产品：RBSMC细胞、RMS 13细胞、KNS-42细胞
HNE2细胞系相关产品：SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
ChaGo K-1细胞系相关产品：UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞
AHH1细胞系相关产品：GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞
SNU387细胞系相关产品：3T3L1细胞、SNU739细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品：Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞
EB-1细胞系相关产品：SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
U-373MG ATCC细胞系相关产品：IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞
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NCI-H810细胞系相关产品：ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
Keio University-19-19细胞系相关产品：SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞
UK Pan-1细胞系相关产品：HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞
SUM 52细胞系相关产品：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞
NL-20细胞系相关产品：RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞
A-172细胞系相关产品：SK Mel 2细胞、HPAF-2细胞、KALS-1细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品：MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞
IR 983F细胞系相关产品：MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞
KY180细胞系相关产品：SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞
CEM.C1细胞系相关产品：10RGB细胞、NCIH23细胞、MN-9D细胞
LLC-MK2 Thawing恒河猴肾细胞系
NCIH345细胞系相关产品：COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞
ssMCF-7细胞系相关产品：NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
JHH7细胞系相关产品：TE354.T细胞、GM03190细胞、WERI-Rb-1细胞
Earles's cells细胞系相关产品：BC3 H1细胞、OCI-LY-8细胞、NCI-SNU-C2B细胞
MKN-74细胞系相关产品：RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞
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Nittby-Salford 1细胞系相关产品：FAK+/+细胞、H-1522细胞、Dx5细胞
C-33A细胞系相关产品：NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
THP1细胞系相关产品：HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞
VMM5细胞系相关产品：NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞
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