MDA-MB-134-VI 人乳腺导管癌细胞系

"MDA-MB-134-VI 人乳腺导管癌细胞系
细胞背景资料：该细胞１９７３年由R. Cailleau建系，源自７４岁乳腺导管癌女性患者的胸腔积液，细胞生长缓慢，松散贴壁，生长过程中会脱落到培养基，不会汇合，过表达FGF受体 
细胞形态：上皮细胞样 
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够高，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻最近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MDA-MB-134-VI 人乳腺导管癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２—３次 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：松散贴壁生长 
MDA-MB-134-VI 人乳腺导管癌细胞系
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。 
细胞形态特性：上皮细胞样 
H-1105细胞系相关产品：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞 
GM2219C细胞系相关产品：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞 
DoHH2细胞系相关产品：VMRCRCZ细胞、KYSE 180细胞、H-2291细胞 
CAL 51细胞系相关产品：Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞 
32D:cl3细胞系相关产品：Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞 
AMJ2-C8细胞系相关产品：ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞 
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品：NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞 
SW-900细胞系相关产品：HD11细胞、Hs68细胞、AMO1细胞 
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RBMVEC细胞系相关产品：DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞 
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KRCY细胞系相关产品：MDCK-II细胞、Ly18细胞、MDA231-LM2细胞 
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H-1437细胞系相关产品：H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞 
MUTZ-1细胞系相关产品：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞 
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Panc-8_13细胞系相关产品：HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞 
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MDA-MB-134-VI 人乳腺导管癌细胞系
BRL-3A细胞系相关产品：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞 
TB-1 Lu细胞系相关产品：Jurkat细胞、b.End3细胞、D341MD细胞 
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C127细胞系相关产品：M 1细胞、PTK 1细胞、TE6细胞 
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MDA-MB-134-VI 人乳腺导管癌细胞系
M-O7e细胞系相关产品：HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞 
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