LSC-1 大鼠肝星形细胞系

"LSC-1 大鼠肝星形细胞系
细胞背景资料：肝星形细胞；自发永生；Wistar 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
LSC-1 大鼠肝星形细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
LSC-1 大鼠肝星形细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞 
SW954细胞系相关产品：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞 
SNU-475细胞系相关产品：SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞 
MA-c细胞系相关产品：H69/P细胞、UMUC-3细胞、Alexander cells细胞 
no.11细胞系相关产品：HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞 
KMS18细胞系相关产品：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞 
Caco-2BBe细胞系相关产品：SW 954细胞、SCC-9细胞、NCI-H2141细胞 
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞 
WM-451Lu细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-1666细胞、LN-18细胞 
PC12(高分化)细胞系相关产品：Oregon J-111细胞、HO-1-N-1细胞、PC3细胞 
H548细胞系相关产品：Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞 
SK-N-MC细胞系相关产品：Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞 
HET1A细胞系相关产品：COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞 
SK-GT-2细胞系相关产品：D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞 
NW38细胞系相关产品：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞 
N87细胞系相关产品：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞 
N87细胞系相关产品：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞 
NCI-H596细胞系相关产品：MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞 
NCIH1299细胞系相关产品：H1650_CO细胞、JS1细胞、Swiss 3T6细胞 
KYSE-450细胞系相关产品：MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞 
LSC-1 大鼠肝星形细胞系
NCIH1963细胞系相关产品：C1498细胞、NR-8383细胞、ES2细胞 
22Rv-1细胞系相关产品：SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞 
T/G HA-VSMC细胞系相关产品：OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞 
H-865细胞系相关产品：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞 
CBRH7919细胞系相关产品：CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞 
AgC11x3A细胞系相关产品：Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞 
2B4-L细胞系相关产品：SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞 
H-520细胞系相关产品：QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞 
JIMT1细胞系相关产品：SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞 
LUDLU 1细胞系相关产品：HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞 
MDA-MB-231-luc细胞系相关产品：211H细胞、Co320细胞、HFF1细胞 
H-322细胞系相关产品：LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞 
293T/17细胞系相关产品：SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞 
PaTu-8988s细胞系相关产品：8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞 
KMH2细胞系相关产品：SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞 
KCL-22细胞系相关产品：Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞 
TE-85 clone 5细胞系相关产品：TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞 
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞 
HepG2细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞 
HCC1954 BL细胞系相关产品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞 
H-1694细胞系相关产品：HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞 
NBLAN5T细胞系相关产品：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞 
SkMel31细胞系相关产品：CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞 
Kit-225-K6细胞系相关产品：OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE­8.1/2细胞 
Reuber-H-35 hepatoma细胞系相关产品：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞 
MGHU3细胞系相关产品：MOLT.4细胞、WM-115细胞、NCIH1963细胞 
LN-18细胞系相关产品：SLK细胞、RH30SJ细胞、WM 266-4细胞 
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞 
ONS-76细胞系相关产品：3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞 
RPMI8226/S细胞系相关产品：HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞 
OCI-Ly1细胞系相关产品：THPI细胞、Mahlavu细胞、HCC1500细胞 
CCC-HHM-2细胞系相关产品：CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞 
H-1435细胞系相关产品：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞 
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞 
LOU-NH91细胞系相关产品：CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞 
Hs819T细胞系相关产品：HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞 
SuDHL 8细胞系相关产品：ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞 
Bat lung细胞系相关产品：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞 
LNCaP.FGC细胞系相关产品：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞 
Hs 343.T细胞系相关产品：TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞 
FET细胞系相关产品：CTLL-2细胞、N-Tera-2细胞、H-1563细胞 
LSC-1 大鼠肝星形细胞系
NCIH2228细胞系相关产品：KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞 
Pa18C细胞系相关产品：HS-766T细胞、BSC40细胞、NCI-441细胞 
KU-812细胞系相关产品：PC14细胞、2008细胞、NKT细胞 
FHs 74 Int细胞系相关产品：KPL1细胞、H-510细胞、HEC-251细胞 
H-522细胞系相关产品：HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞 
HEK 293FT细胞系相关产品：CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞 
BL6细胞系相关产品：UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞 
SW 962细胞系相关产品：OCI-Ly07细胞、MMAc.SF细胞、SNU-119细胞 
HD-LM-2细胞系相关产品：EOC 20细胞、GM04679细胞、FU-MMT-1细胞 
H2073细胞系相关产品：253J B-V细胞、TEV-1细胞、Tn 5B1-4细胞 
16HBEo-细胞系相关产品：NCIH3255细胞、H-1781细胞、SKLMS-1细胞 
SNU-475细胞系相关产品：SuDHL 10细胞、CTLA4 Ig-24细胞、KU 812F细胞 
"