KBM-5 人慢性髓白血病细胞系

"KBM-5 人慢性髓白血病细胞系
细胞背景资料：慢性髓白血病；女性 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KBM-5 人慢性髓白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
KBM-5 人慢性髓白血病细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCI-H220细胞系相关产品：HEC-1A细胞、WM 239细胞、MUTZ1细胞 
SY5Y细胞系相关产品：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞 
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞 
SNU-886细胞系相关产品：SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞 
Eph4 1424细胞系相关产品：HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞 
HCFB（HCF）细胞系相关产品：WEHI-231细胞、MG63细胞、OVCAR 420细胞 
HCA-7细胞系相关产品：VP267细胞、Hep G2-Luc细胞、PBL细胞 
PLA-801C细胞系相关产品：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞 
V-79细胞系相关产品：NCI-SNU-5细胞、H9细胞、SKM1细胞 
3D4/21细胞系相关产品：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞 
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞 
RAT2细胞系相关产品：Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞 
U-118 MG细胞系相关产品：DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞 
BJAB细胞系相关产品：COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞 
HT1080细胞系相关产品：PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞 
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞 
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞 
5637细胞系相关产品：2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞 
NCIH2170细胞系相关产品：Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞 
P3JHR-1细胞系相关产品：SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞 
KBM-5 人慢性髓白血病细胞系
0V-1063细胞系相关产品：A2780S细胞、QGY 7701细胞、JB 6细胞 
PE/CA-PJ-34细胞系相关产品：SK-OV-433细胞、SUM52细胞、S-16细胞 
LC1/Sq细胞系相关产品：Hs 822.T细胞、Be-Wo细胞、HCC-1806细胞 
D407细胞系相关产品：NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞 
NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞系相关产品：293GP细胞、KY70细胞、CHO-ori细胞 
HCoEpiC细胞系相关产品：P36细胞、C8D1A细胞、HONE-1细胞 
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞 
CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品：NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞 
RC-2细胞系相关产品：HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞 
RPMI-8226S细胞系相关产品：RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞 
P-388D1细胞系相关产品：OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞 
J45.01细胞系相关产品：H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞 
H841细胞系相关产品：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞 
P-815细胞系相关产品：P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞 
Y1细胞系相关产品：CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞 
OPM-2细胞系相关产品：NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞 
OS-RC-2细胞系相关产品：NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞 
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ECC-12细胞系相关产品：RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞 
PanC1细胞系相关产品：TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞 
SK-MEL-1细胞系相关产品：BV173细胞、ACC-M细胞、MDA-436细胞 
H-526细胞系相关产品：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞 
NCI H747细胞系相关产品：NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞 
P560细胞系相关产品：HuT-78细胞、H889细胞、OVCAR-10细胞 
U118细胞系相关产品：HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞 
GP2-293细胞系相关产品：AM38细胞、COLO320-DM细胞、NCI-H1944细胞 
HSC-6细胞系相关产品：PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞 
CSQT-2细胞系相关产品：Blotchy fibroblast-11细胞、COR-L88细胞、BT-474细胞 
HSC（Human Schwann）细胞系相关产品：CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞 
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞 
SW-982细胞系相关产品：LADMAC细胞、C4I细胞、YD-38细胞 
IPEC1细胞系相关产品：SKNBE2C细胞、hFOB细胞、Mel526细胞 
MGH-U3细胞系相关产品：RC-K8细胞、AR4-2J细胞、PANC1005细胞 
EJ1细胞系相关产品：SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞 
HT3细胞系相关产品：FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞 
T-98G细胞系相关产品：COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞 
WEHI164细胞系相关产品：RMS 13细胞、BL2141细胞、HCC0202细胞 
SKOV-3细胞系相关产品：MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞 
H1781细胞系相关产品：MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞 
NUGC4细胞系相关产品：HCEpiC细胞、IGROV-1细胞、TGW-nu-1细胞 
SH-SY5Y Parental细胞系相关产品：KYSE-70细胞、YD38细胞、Calu6细胞 
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MH-S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞 
SKO3细胞系相关产品：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞 
OCIAML3细胞系相关产品：BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞 
H69C细胞系相关产品：H522细胞、MEF (CF-1)细胞、Jurkat E6-1细胞 
B16/F10细胞系相关产品：Panc_05_04细胞、CAL 39细胞、HCC366细胞 
G-361细胞系相关产品：U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞 
AN3CA细胞系相关产品：MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞 
Jurkat-E6细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞 
H-2081细胞系相关产品：PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞 
A-172 MG细胞系相关产品：HCC-827细胞、WRL68细胞、H378细胞 
Anip 973细胞系相关产品：OE21细胞、PCI:SG-231细胞、GM2131细胞 
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、HPBALL细胞、KYSE0520细胞 
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