HCEC-B4G12细胞：人角膜内皮细胞系

"HCEC-B4G12细胞：人角膜内皮细胞系
细胞背景资料：角膜；内皮细胞；SV４０转化；女性
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到６３%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，９５%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
LC-1/sq细胞系相关产品：Panc 10.05细胞、Scott细胞、EC-GI细胞
ARH77细胞系相关产品：H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞
NCI-H2591细胞系相关产品：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞
R.K.13细胞系相关产品：MDA-MB-134-VI细胞、Microbiological Associates-104细胞、OCI AML5细胞
LM-TK-细胞系相关产品：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
SuDHL 1细胞系相关产品：HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞
MBT-2细胞系相关产品：HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
Panc3_27细胞系相关产品：PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞
MKN7细胞系相关产品：Panc 1细胞、HS-445细胞、WM266mel细胞
Ca761细胞系相关产品：NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
Panc4.03细胞系相关产品：RMG-1细胞、EB2细胞、Melanoma 14细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
U-87-MG细胞系相关产品：MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
NCIH1568细胞系相关产品：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
IPEC-1细胞系相关产品：P3 (Jiyoye)细胞、CCRF/CEM/0细胞、SKNO1细胞
HH [Human lymphoma]细胞系相关产品：NCIH1184细胞、H-1882细胞、C2A细胞
SF126细胞系相关产品：KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞
SW 527细胞系相关产品：UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
HS0578T细胞系相关产品：L cells (TK-)细胞、TK 10细胞、MGc80-3细胞
H1435细胞系相关产品：Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
LIM 1215细胞系相关产品：U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
NS20-Y细胞系相关产品：F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
Karpas422细胞系相关产品：CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞
EOC 20细胞系相关产品：SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞
FLS细胞系相关产品：Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞
NCI-H2073细胞系相关产品：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞
CCRF CEM细胞系相关产品：ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
CAL-33细胞系相关产品：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
Murine Leydig Tumor细胞：-1细胞系相关产品：GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞
C1498细胞系相关产品：EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
COLO 824细胞系相关产品：KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞
HCC9724细胞系相关产品：BIU87细胞、MRAEC细胞、T-47D细胞
VeroC1008细胞系相关产品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
HCC0038细胞系相关产品：U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
TE 671细胞系相关产品：SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞
HCC-95细胞系相关产品：Kit-225细胞、HDQ-P1细胞、DMS-273细胞
SKNDZ细胞系相关产品：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
Rat 1细胞系相关产品：HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞系相关产品：NIH/3T3细胞、BV-173细胞、HEK/293细胞
COLO680N细胞系相关产品：CCC-HSF-1细胞、SNU182细胞、LS411N细胞
OCI-Ly 8细胞系相关产品：K562/ADP细胞、MOLT3细胞、MDA-MB-436细胞
HEH2细胞系相关产品：Walker/LLC-WRC256细胞、SNU119细胞、Huh-7.5细胞
CAL 12T细胞系相关产品：HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞
C4-I细胞系相关产品：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
KOSC-2细胞系相关产品：OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品：NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞
A7r5细胞系相关产品：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
HLF-a细胞系相关产品：TW01细胞、MDAMB330细胞、COLO.205细胞
NCIH1395细胞系相关产品：C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞
LM(TK-)细胞系相关产品：HCC0015细胞、373 MG细胞、B/C3T3细胞
TE-11细胞系相关产品：HuPT4细胞、COV434细胞、RPMI6666细胞
H-2228细胞系相关产品：VB细胞、KE-39细胞、KP-N-RT-BM细胞
U251-MG细胞系相关产品：Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞
KYSE 70细胞系相关产品：REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞
SK-MEL28细胞系相关产品：Hs 606.T细胞、Hs863T细胞、FRTL-5 Cl 2细胞
MOLT 3细胞系相关产品：BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品：NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞
SW-837细胞系相关产品：P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞
NCI H157细胞系相关产品：Hs-606-T细胞、HPAF/CD18细胞、KGN细胞
D-283细胞系相关产品：NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞
SUM149细胞系相关产品：KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞
NCIH2122细胞系相关产品：LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
H2122细胞系相关产品：HTR-8/SV-neo细胞、H2023细胞、RMa-bm细胞
Hs-606-T细胞系相关产品：SKES1细胞、NCIH1838细胞、LP-1细胞
Nb2-11细胞系相关产品：NCI-H2444细胞、L-363细胞、MFE 280细胞
SK-N-FI细胞系相关产品：Tb 1 Lu细胞、P3/X63/Ag8细胞、MCF 10A细胞
Hs 895 T细胞系相关产品：CP-70细胞、THP-1细胞、MLTC-1细胞
CAL-33细胞系相关产品：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
MES-SA-Dx5细胞系相关产品：CAL-39细胞、MCA-38细胞、WC00097细胞
NCI-1155细胞系相关产品：GM05372细胞、MDA157细胞、COS7细胞
NCI-H2591细胞系相关产品：AML 12细胞、TK-10细胞、K-562细胞
NCI-446细胞系相关产品：Rat Glomerular Endothelial细胞、Scott and White No. 13细胞、H-1672细胞
"