"TYK-nu Cells|人卵巢癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
PM6细胞系相关产品:H-1694细胞、hEEC细胞、HCT116细胞
MODE-K细胞系相关产品:RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞
PK13细胞系相关产品:MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞
细胞生长:贴壁
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
TYK-nu Cells|人卵巢癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
MDA-435细胞系相关产品:GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
Mouse Forestomach Carcinoma细胞系相关产品:MCA 205细胞、GM00346B细胞、Capan-1细胞
HCC44细胞系相关产品:NCIH358细胞、SF295细胞、ME1细胞
OVCAR.3细胞系相关产品:Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞
细胞传代方法:1:2传代
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。传代细胞培养操作步骤:1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TYK-nu Cells|人卵巢癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
SUM-159细胞系相关产品:NCI-H1341细胞、HS5细胞、JurkatE6-1细胞
Earles's cells细胞系相关产品:BC3 H1细胞、OCI-LY-8细胞、NCI-SNU-C2B细胞
RCC 7860细胞系相关产品:COLO-205细胞、WEHI231细胞、CAKI 2细胞
Anip[973]细胞系相关产品:B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
V79-GalK1细胞系相关产品:GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞
PK 15细胞系相关产品:MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞
HPAEC细胞系相关产品:Vero细胞、FBHE细胞、SK-SH-SY5Y细胞
MAVER-1细胞系相关产品:AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
PK13细胞系相关产品:MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞
BC3H-1细胞系相关产品:769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞
293GP细胞系相关产品:BT.549细胞、H-23细胞、R3/1细胞
HCC0078细胞系相关产品:HT144细胞、OVCAR-4细胞、HRCEC细胞
TYK-nu Cells|人卵巢癌细胞系
hTERT RPE1细胞系相关产品:RPMI-8226细胞、MHCC97-H细胞、H-2108细胞
KYSE0030细胞系相关产品:hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞
HuH1细胞系相关产品:NCI-H747细胞、Wien133细胞、AKR细胞
HS-445细胞系相关产品:PC.3细胞、HLE-SRA-01/04细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞
A-704细胞系相关产品:CEM C7细胞、HCV29细胞、NCI-H676B细胞
Clone M-3细胞系相关产品:MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞
Panc_04_03细胞系相关产品:YD38细胞、J 111细胞、SNU-739细胞
MKN 28细胞系相关产品:AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
MKN 28细胞系相关产品:AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
MALME.3M细胞系相关产品:P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞
KU-812F细胞系相关产品:E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞
Hs839.T细胞系相关产品:SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
H727细胞系相关产品:OCM-1细胞、A2780/CP70细胞、NCI-H358细胞
AML-193细胞系相关产品:SNU878细胞、KYSE 30细胞、Kelly细胞
Lewis-Lung细胞系相关产品:NCIH187细胞、CCRF细胞、HCC-1954细胞
MC3T3细胞系相关产品:P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞
BTT739细胞系相关产品:U-937细胞、H1869细胞、My-La 2059细胞
WM35细胞系相关产品:A-172细胞、293F细胞、H-2286细胞
SK-MEL-28细胞系相关产品:HSF细胞、AQ-Mel细胞、4-1st细胞
Hs683T细胞系相关产品:H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞
624 MEL细胞系相关产品:SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
HEK/293细胞系相关产品:VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
LIPF178C细胞系相关产品:NEC8细胞、GM04154细胞、C41细胞
COLO-741细胞系相关产品:HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞系相关产品:NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
G292细胞系相关产品:Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
U2-OS细胞系相关产品:bEnd3细胞、SK-RC-52细胞、OAW-42细胞
CNE细胞系相关产品:JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞
Potorous tridactylus Kidney 2细胞系相关产品:KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞
LS-411细胞系相关产品:H1693细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞、OVCA433_Bast细胞
HCC15细胞系相关产品:FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
WM 266-4细胞系相关产品:CMT 167细胞、SNU484细胞、CTLL-2细胞
H-2342细胞系相关产品:HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞
MCF-12A细胞系相关产品:LSC-1细胞、SKHEP-1细胞、EB-2细胞
HS-766T细胞系相关产品:SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞
PL12细胞系相关产品:16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
PL12细胞系相关产品:16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
Hs27F细胞系相关产品:LWnt3A细胞、IPLB-Sf21-AE细胞、HLEpiC细胞
LIXC-002细胞系相关产品:B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
NCI-H2172细胞系相关产品:Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞
REC细胞系相关产品:JROECL21细胞、SUD6细胞、C4-2B细胞
SCL1细胞系相关产品:NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞
VMM5A细胞系相关产品:CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
TGW细胞系相关产品:Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞
Ly7细胞系相关产品:CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品:PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
SNU-878细胞系相关产品:HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
NCIH522细胞系相关产品:Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
He-La细胞系相关产品:NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞
Hepa-RG细胞系相关产品:SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞
TYK-nu Cells|人卵巢癌细胞系
SF-126细胞系相关产品:HGSMC细胞、KP 4细胞、BIC细胞
Vertebral Cancer of the Prostate细胞系相关产品:CT26.WT细胞、CCD1095Sk细胞、NCI747细胞
HPAC细胞系相关产品:JVM-3细胞、Psi-2-DAP细胞、EB-3细胞
Mono-Mac-6细胞系相关产品:IMCD3细胞、Ect1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞
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