CBRH-7919 Thawing大鼠肝癌细胞系

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中文名称:CBRH-7919 Thawing大鼠肝癌细胞系	英文名称:CBRH-7919 Thawing
保存条件: 低温避光	纯度规格: 1x10(6)viable cells/ml
产品类别: 有机化学品

"CBRH-7919 Thawing大鼠肝癌细胞系

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

CBRH-7919 Thawing大鼠肝癌细胞系

细胞生长：贴壁

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

贴壁细胞传代实验准备事项：将15mL离心管、T25细胞培养瓶、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用。贴壁细胞传代实验步骤：将准备好的培养基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；从培养箱中取出待处理的细胞，在显微镜下观察细胞状态；用酒精消毒培养瓶，放入安全柜中；轻轻吸去细胞上清；加入2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，轻轻晃匀、覆盖所有细胞后，置于37℃培养箱静置消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；按比例将细胞悬液分装至培养瓶中；在显微镜下观察传代后的细胞密度及状态；将培养瓶放入培养箱中培养。注意事项：培养过程中需维持细胞处于对数生长期，80%左右即可传代，传代比例请参照说明书建议；消化时间不宜过长，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，难消化的细胞可分次消化，每次时间不超过5min；培养过程中需要定期换液，一般细胞建议2~3天换液一次。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

CBRH-7919 Thawing大鼠肝癌细胞系

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。

细胞形态特性：详见细胞说明书

KMB17细胞系相关产品：Verda reno细胞、CNE-2Z细胞、801-D细胞

KBM5细胞系相关产品：KMM-1细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、NW38细胞

NCIH2591细胞系相关产品：KS-SLK细胞、Mouse Colon 38细胞、Meat Animal Research Center-145细胞

NCIH2135细胞系相关产品：MES-SA-Dx5细胞、OE-21细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞

NCI-Hut 125细胞系相关产品：R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞

RINm5F细胞系相关产品：AMO1细胞、U138MG细胞、SKHEP-1细胞

HTR-8/SV-neo细胞系相关产品：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞

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JHH-2细胞系相关产品：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞

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公司简介

上海宾穗生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售与服务于一体的专业生物制品和化学品供应商。公司总部位于上海市莘庄工业区，拥有现代化办公大楼、标准实验室与生产厂房。上海宾穗生物科技有限公司拥有一支由教授和博士为核心的技术团队，提供超过100000的生物、化学产品，产品涵盖化学、医药、材料、能源、生物等科研领域。公司秉承“客户至上、服务一流”的发展理念，致力于将优质的产品和服务提供给客户。上海宾穗生物科技有限公司整合众多的优势市场资源，以匠心服务广大客户，我们可以为客户提供Binsui、TCI等国内外各种品牌的高品质试剂产品，充分满足客户的试剂需求。

成立日期	2018-01-10 （7年）	注册资本	635万元人民币
员工人数	50-100人	年营业额	￥ 500万-1000万
主营行业	通用试剂,高纯试剂,催化试剂,基础无机试剂	经营模式	试剂

上海宾穗生物科技有限公司

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公司成立：7年
注册资本：635万元人民币
企业类型：有限责任公司(自然人投资或控股)
主营产品：生物试剂、化学试剂、标准品、化工试剂
公司地址：李经理（手机号和微信号：18301908279 QQ：1292752157）上海市紫竹科学园区

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