ChaGo-K-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺支气管癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

LS-123细胞类似产品：：Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞

CCD33Co细胞类似产品：：T-47D细胞、U118-MG细胞、Leukemia L1210细胞

MFE 280细胞类似产品：：C57 Mouse Tumor 64细胞、SK ES 01细胞、HCC-1833细胞

GS9L细胞类似产品：：Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞

MA-c细胞类似产品：：H69/P细胞、UMUC-3细胞、Alexander cells细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。

细胞传代方法：１：４-１：８传代；每周换液２次。

NCI-H1693细胞类似产品：：MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞

ARH77细胞类似产品：：H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞

OVCA 433细胞类似产品：：Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞

JB-6 Cl 30细胞类似产品：：U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞

HepG2细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

ChaGo-K-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺支气管癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长

M-20细胞类似产品：：HCCC9810细胞、CAL148细胞、MUVEC细胞

YD-38细胞类似产品：：H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞

SK Mel 2细胞类似产品：：VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞

RPMI-7951细胞类似产品：：HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞

NU-GC-2细胞类似产品：：NCI-460细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞

A-673细胞类似产品：：NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

High Five细胞类似产品：：KLN-205细胞、SW-48细胞、D-341细胞

Glioma 261细胞类似产品：：A431细胞、KYSE450细胞、WM 115细胞

CoC1细胞类似产品：：D324细胞、L540细胞、74Int细胞

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Madin Darby Bovine Kidney细胞类似产品：：LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞

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Jijoye细胞类似产品：：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞

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Fetal Rhesus Kidney-4细胞类似产品：：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞

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J.E6-1细胞类似产品：：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞

CNE2细胞类似产品：：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞

B16-BL6细胞类似产品：：C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞

UACC 893细胞类似产品：：M2-10B4细胞、RT-BM-1细胞、293S细胞

J774 A.1细胞类似产品：：SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞

NCIH1299细胞类似产品：：H1650_CO细胞、JS1细胞、Swiss 3T6细胞

EFM192C细胞类似产品：：C3H/10T1/2-clone8细胞、LS411N细胞、H3255_DA细胞

SUDHL-4细胞类似产品：：NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞

TFH细胞类似产品：：RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞

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ASPC1细胞类似产品：：HT-144细胞、TE671/RD细胞、MFM223细胞

UM-UC14细胞类似产品：：NCIH510细胞、T241细胞、Swiss3T3细胞

H1666细胞类似产品：：Hs 888.Lu细胞、D-341 Med细胞、MB157细胞

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