8505C Cells(赠送Str鉴定报告)|人甲状腺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

HLE B-3细胞类似产品：：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞

293 c18细胞类似产品：：NCI-SNU-668细胞、HPAF-I细胞、A431/P细胞

MUS-M1细胞类似产品：：KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞

MFD-1细胞类似产品：：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞

ZR-75-1细胞类似产品：：H-522细胞、G-Olig2细胞、DMS-114细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：６传代

Panc02-H0细胞类似产品：：PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞

HT-22细胞类似产品：：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞

BT325细胞类似产品：：QGY细胞、J82细胞、HuH7细胞

8305C细胞类似产品：：MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞

LLC-PK1细胞类似产品：：TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

A9 (Hamprecht)细胞类似产品：：HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞

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Colo699细胞类似产品：：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞

Vero from pool #76细胞类似产品：：TM-3细胞、DoTc2 4510细胞、HCE-2 [50.B1]细胞

Hs852细胞类似产品：：FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞

293-EBNA细胞类似产品：：Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

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HCC-1395细胞类似产品：：SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞

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T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞类似产品：：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞

NCIH2023细胞类似产品：：CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞

H341细胞类似产品：：MTEC1细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、MDAMB435细胞

CMT-93细胞类似产品：：Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞

OEC19细胞类似产品：：TE671细胞、PE/CA-PJ34细胞、Mia PACA 2细胞

BxPC-3细胞类似产品：：RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞

ECC10细胞类似产品：：HCT116细胞、AM-38细胞、UPCISCC090细胞

CCD 1112SK细胞类似产品：：OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞

293EBNA细胞类似产品：：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞

X63-Ag 8.6.5.3细胞类似产品：：MX1细胞、TC7细胞、Nb 2细胞

FLC-7细胞类似产品：：B16 F10细胞、Panc 8.13细胞、HT1197细胞

Soleus clone 8细胞类似产品：：Rat Glomerular Endothelial细胞、Scott and White No. 13细胞、H-1672细胞

BGC-823细胞类似产品：：NCI-H23细胞、HECV细胞、HCT 116细胞

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