TCCSUP Cells(赠送Str鉴定报告)|人膀胱移行细胞癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

Danio rerio Gill细胞类似产品：：SKG-3a细胞、343MG细胞、FHs74Int细胞

ssMCF7细胞类似产品：：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞

U118MG细胞类似产品：：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞

Vx-2细胞类似产品：：HuPT3细胞、GL-261细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞

FO [Mouse myeloma]细胞类似产品：：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

收到常温复苏细胞后，具体操作步骤1)首先，观察细胞培养瓶是否完HAO，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。2)用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。3)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。4)静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。5)贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。6)悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。温馨提醒：1)可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。2)确认细胞状态良HAO后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。

细胞传代方法：１：２-１：３传代，２-３天换液１次。

MDAPCa2b细胞类似产品：：TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞

Vero E-6细胞类似产品：：OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞

U87细胞类似产品：：PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞

HOP 62细胞类似产品：：SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞

TE 32.T细胞类似产品：：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

CHL-CL-11细胞类似产品：：AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞

RPE-hTERT细胞类似产品：：alpha TC1.6细胞、NTERA2细胞、D-283MED细胞

Neuro2a细胞类似产品：：DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞

TE-32细胞类似产品：：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞

EO771细胞类似产品：：NCIH841细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞、Hs 852.T细胞

SKMEL28细胞类似产品：：Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

CMK细胞类似产品：：LS-411细胞、CV-1细胞、NCI-H128细胞

Med 341细胞类似产品：：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞

GM00215A细胞类似产品：：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞

JurkatE6-1细胞类似产品：：Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞

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H-650细胞类似产品：：LCLC103H细胞、ARO 81-1细胞、AtT 20细胞

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Mv.1.Lu细胞类似产品：：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞

HCC-827细胞类似产品：：MCF-7B细胞、NCI-H1341细胞、SW 527细胞

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HFB细胞类似产品：：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞

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KYSE-450细胞类似产品：：MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞

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L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品：：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞

TE3A细胞类似产品：：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞

WEHI-3细胞类似产品：：BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞

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QGY-7703细胞类似产品：：FLC7细胞、PFSK1细胞、MDCK2细胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞类似产品：：AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞

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P 3 HR 1细胞类似产品：：SK-MEL-31细胞、Monomac-1细胞、NCI-HUT-460细胞

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NCI-H735细胞类似产品：：OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞

J774A1细胞类似产品：：H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞

SK-RC-42细胞类似产品：：LoMeT-ccRcc细胞、U87细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞

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DMS 114细胞类似产品：：MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞

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Karpas422细胞类似产品：：CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞

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QSG7701细胞类似产品：：SKUT-1细胞、CCRF-SB细胞、PGBE1细胞

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WM-2664细胞类似产品：：Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞

SuDHL 1细胞类似产品：：HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞

MHH-CALL-2细胞类似产品：：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞

CAL-85-1细胞类似产品：：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞

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STO细胞类似产品：：NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞

A549ATCC细胞类似产品：：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞

SV40-MES13细胞类似产品：：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞

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H-1694细胞类似产品：：HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞

Roswell Park Memorial Institute 7666细胞类似产品：：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞

T. T细胞类似产品：：Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞

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373 MG细胞类似产品：：OEC19细胞、MAVER1细胞、NCIH295R细胞

MV-4-11细胞类似产品：：OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞

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HEK 293A细胞类似产品：：ESC-410细胞、LC-1/sq细胞、RGC5细胞

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NCI-H1819细胞类似产品：：NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞

U-hth74细胞类似产品：：MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞

H-1522细胞类似产品：：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞

L5178-R细胞类似产品：：Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞

P388-D1细胞类似产品：：SCL-I细胞、SU8686细胞、CoCL3细胞

Hs819T细胞类似产品：：HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞

CCK-81细胞类似产品：：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞

KMS18细胞类似产品：：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞

MCM细胞类似产品：：P-36细胞、C3H 10T1/2细胞、MFE280细胞

NCIH1734细胞类似产品：：SUDHL-1细胞、NCI-H1395细胞、SW-403细胞

SW-1990细胞类似产品：：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞

UC-3细胞类似产品：：HCFB（HCF）细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞

Clone 15 HL-60细胞类似产品：：Hs-578Bst细胞、PCI:SG231细胞、MDA MB 436细胞

IOSE 80细胞类似产品：：H2330细胞、HEK293-F细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞

GM00215A细胞类似产品：：HOSEpiC细胞、HEK 293FT细胞、4T1细胞

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