K1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人甲状腺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：贴壁

Caki-2细胞类似产品：：SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞

NCIH2170细胞类似产品：：Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞

PC-3M 2B4细胞类似产品：：KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞

P-2003细胞类似产品：：SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞

NS-1细胞类似产品：：MADB 106细胞、MLOY4细胞、KYSE-140细胞

K1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人甲状腺癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２传代

RT4-D6P2T细胞类似产品：：Jiyoye(P-2003)细胞、IAR 20细胞、QSG-7701细胞

C666-1细胞类似产品：：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞

no.11细胞类似产品：：HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞

BTI-Tn-5B1-4细胞类似产品：：RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞

751细胞类似产品：：SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

K1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人甲状腺癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长　

MDAMB435细胞类似产品：：NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞

MKN 28细胞类似产品：：AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞

NCI H295R细胞类似产品：：NCI-H1092细胞、RERFLCMS细胞、SUIT2细胞

MADISON LUNG TA-109细胞类似产品：：PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞

NCI.H522细胞类似产品：：PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞

LA-N-6细胞类似产品：：NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

WEHI-3B细胞类似产品：：Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞

MGECs细胞类似产品：：SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞

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H4IIEC3细胞类似产品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、MM1-S细胞、HCC2108细胞

Roswell Park Memorial Institute 1788细胞类似产品：：EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞

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Ku812细胞类似产品：：VK-2/E6E7细胞、HTh 74细胞、EFM192细胞

Jurkat-FHCRC细胞类似产品：：SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞

As-PC1细胞类似产品：：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞

NCI-BL2141细胞类似产品：：UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞

HKF细胞类似产品：：H-157细胞、OV1063细胞、NCIH520细胞

H-1975细胞类似产品：：SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞

JCA-1细胞类似产品：：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞

TMK-1细胞类似产品：：MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞

HCC-94细胞类似产品：：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞

KRC/Y细胞类似产品：：VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞

HeLa229细胞类似产品：：RT-BM-1细胞、CA-46细胞、OCI-Ly 7细胞

LOU-NH91细胞类似产品：：CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞

253J B-V细胞类似产品：：MNNG/HOS Cl #5细胞、HEC-1A细胞、H838细胞

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UPCI:SCC154细胞类似产品：：PTK1细胞、CAL-51细胞、NCI-H2591细胞

HEC-1-A细胞类似产品：：WSU-DLCL2细胞、H-2085细胞、Line 697细胞

C33-A细胞类似产品：：JM细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、IMCD3细胞

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