概述[1]
罗红霉素为第二代半合成大环内酯类作抗生素,主要通过抑制菌体蛋白质的合成,而起到杀菌作用,抗菌谱广,起效快,杀菌力强,主要用于畜禽的呼吸道感染如猪的肺炎、喘气病,流行性感冒、鸡慢呼等,或因传喉、传支、传鼻引起的继发感染等。此外,罗红霉素对肠道病也有较好疗效。但是,罗红霉素违规用于畜禽养殖,会影响畜禽疫病防治和畜禽产品安全、增加细菌产生耐药性的风险、威胁人类健康。所以需要检测其含量,罗红霉素-D7应运而生,其可用于检测罗红霉素残留量。
应用[1]
一种动物毛发中罗红霉素残留量的检测方法,包括以下步骤:
1.供试品溶液的制备
取动物毛发样品置于医用纱布中,清洗,研磨,与氨水和甲醇的混合溶液混合,然后加入罗红霉素-D7工作液,室温超声30~60min,获得毛发水解液,过滤,吹干,用甲醇水溶液和正己烷溶解残渣,离心,作为供试品溶液;
2.高效液相色谱-串联质谱法检测
高效液相色谱条件:色谱柱:C18,2.1mm×100mm,1.8μm;流动相A为体积浓度为0.1%甲酸水溶液,流动相B为甲醇,流速:0.4mL/min;柱温:35℃;进样量:10μL;梯度洗脱程序:0-2min,2%B线性变化至40%B;2~3min,保持40%B,3~4min,40%B线性变化至75%B;4-5min,保持75%B,5~5.1min,75%B线性变化至98%B;5.1-6min,保持98%B;6-6.1min98%降为2%B;6.1~7.0min,维持2%B;
质谱条件:电喷雾离子源,正离子扫描模式;多反应检测:喷雾电压:3000V,离子源温度,150℃,鞘气温度:300℃;鞘气流量:12L/min。
本方法按照内标法以峰面积计算罗红霉素在毛发中的残留量,计算公式为:
X--样品中罗红霉素残留量,单位为微克每千克(μg/kg);
c--罗红霉素标准工作液的浓度,单位为微克每升(μg/L);
c--标准工作溶液内标物罗红霉素-D7的浓度,单位为微克每升(μg/L);
c--样品中溶液内标物罗红霉素-D7的浓度,单位为微克每升(μg/L);
A--罗红霉素标准工作溶液的峰面积;
A--样品中罗红霉素的峰面积;
A--罗红霉素标准工作溶液内标物罗红霉素-D7的峰面积;、
A--样品中罗红霉素-D7的峰面积;
V--样品定容体积,单位为毫升(mL);
m--样品称样量,单位为克(g)。
计算结果需要扣除空白值,结果少于0.3μg/kg时,视为未检出。
以上所述畜禽毛发中罗红霉素残留量的检测方法,所述方法在检测畜禽毛发中的应用,所述畜禽优选为鸡、猪、牛等畜禽类,优选为鸡。
图1阳性畜禽毛发样品及内标物多反应检测(MRM)色谱图;
主要参考资料
[1] [中国发明] CN201811022715.1 一种动物毛发中罗红霉素残留量的检测方法