背景[1-6]
小鼠卵巢上皮细胞提取物是从小鼠原代卵巢上皮细胞提取的，小鼠原代卵巢上皮细胞从正常小鼠卵巢组织制备可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
小鼠卵巢上皮细胞分离自正常小鼠卵巢组织，卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢位于子宫两侧，左右各一，完全包于子宫阔韧带内，并在卵巢门外，借系膜固定于子宫阔韧带。卵巢门处有出入卵巢的血管、神经和淋巴管。 卵巢是一对扁椭圆形的器官，约重4—8克，幼年时卵巢表面光滑，性成熟后，由于卵泡的生长和排卵后结成瘢痕，表面凹凸不平。卵巢表面覆盖着一层上皮，称为生殖上皮。幼年时期上皮细胞呈立方状或柱状，以后随年龄的增长而变扁平。生殖上皮深面有一薄层致密结缔组织构成的白膜，包围卵巢的实质。卵巢的实质可分为外周的皮质与中央的髓质。皮质较宽，由许多处于不同发育阶段的卵泡和黄体及其间的结缔组织构成。髓质只占一小部分，位于中部，由富含血管的疏松结缔组织构成。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。
卵巢上皮细胞主要功能：①上皮细胞能分泌激素，刺激卵细胞分化成熟；②细胞能分泌炎症介质，参与炎症反应。
应用[7][8]
小鼠卵巢上皮细胞提取物可用于小鼠卵巢表面上皮细胞在自发恶性转化过程中间质性及干细胞样特征改变
卵巢表面上皮细胞(Ovarian Surface Epithelial Cell,OSEC)是包被卵巢表面的单层立方-长方形上皮细胞。由于卵巢定期排卵的生理功能，需要上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的正常生物学特性参与卵巢表面上皮的修复。而且近年的研究发现，在卵巢表面以及与输卵管交接的卵巢门区域也存在成体干细胞/肿瘤干细胞(Stem cell,SC/Cancer Stem Cell,CSC)，参与卵巢表面上皮的生理性修复。
探究OSEC起源的上皮性卵巢癌发生早期相关分子事件，为上皮性卵巢癌的防治提供基础研究资料。方法：本研究分为三个部分。
(1)MOSEC自发性恶性转化模型的建立：分离未生育过的雌性BALB/C小鼠的卵巢表面上皮细胞，以上皮细胞标志物Pan-keratin鉴定MOSEC的纯度。在MOSEC体外连续传代培养过程中，使用生长曲线、平板克隆形成及软琼脂克隆形成等实验检测细胞增殖能力，结合恶性转化灶出现的细胞形态和染色体数目的变化，分析MOSEC的体外恶性转化能力，通过裸鼠体内成瘤实验证实MOSEC发生自发恶性转化。
(2)MOSEC自发恶性转化过程中EMT的作用：使用RT2Profiler PCR Array Mouse EMT试剂盒检测EMT相关基因在不同阶段MOSEC表达水平的变化，以E-cadherin和Pan-keratin为上皮细胞标志物，Vimentin、Snail、Slug及β-catenin为间质细胞标志物，采用免疫荧光方法定性定位，以及Western Blotting定量分析MOSEC恶性转化不同时期EMT相关蛋白表达水平的变化。
(3)MOSEC自发恶性转化过程中肿瘤干细胞样特性的变化：以CD44、CD117、CD133、Nanog及Oct-4为干细胞/肿瘤干细胞标志物，采用免疫荧光方法定性定位分析恶性转化不同时期上述标志物的变化，流式细胞仪定量检测CD44+/CD117+细胞在恶性转化不同时期的变化；通过悬浮球细胞形成实验及限制稀释实验检测各阶段MOSEC的自我更新能力；使用无mEGF和mbFGF生长因子，但是含10%FBS的DMEM/F12培养基培养悬浮球细胞，观察其分化能力；最后观察悬浮球细胞在裸鼠体内的致瘤能力。
参考文献
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[7]Isolation and characterization of stem-like cells from a human ovarian cancer cell line[J].Lijuan Wang,Roman Mezencev,Nathan J.Bowen,Lilya V.Matyunina,John F.McDonald.Molecular and Cellular Biochemistry.2012(1-2)
[8]张鹤美.小鼠卵巢表面上皮细胞在自发恶性转化过程中间质性及干细胞样特征改变[D].苏州大学,2014.